Using gel filtration to study ligand - protein interactions

소개

생화학실험 중 하나인 Using gel filtration to study ligand - protein interactions에 대한 예비보고서와 결과보고서입니다.

목차

<예비보고서>
1. 실험제목


2. 실험목적

3. Contents
⑴Ligand binding by macromolecules
⑵binding의 quantitative treatment
⑶ligand-macromolecule interaction의 실험적 측정
⑷Transport properties of serum albumin

4. 시약에 대한 간단한 조사
⑴Bovine serum albumin(BSA : must be essentially fatty acid free)
⑵Acetate buffer(pH 4.0, 4.5, 5.0), Sodium phosphate buffer(pH 6.0, 7.0, 8.0)
⑶Phenol red in buffer
⑷Sephadex G-25-150, Chromatography columns, Fraction collector, Spectrometer for A520 measurements and cuvettes

5. Reference

<결과보고서>
1. Introduction
⑴실험 제목
⑵실험 목적

2. Materials & Procedure
⑴시약 및 초자
⑵실험 과정
*Preparing the Sephadex column
*Eluting phenol red-BSA mixtures on Sephadex columns

3. Results
⑴일정한 pH에서, phenol red의 양을 다르게 하여 실험한 결과값
⑵일정한 phenol red의 양에서, pH를 다르게 하여 실험한 결과값

4. Discussion
⑴각 경우에서 피크가 1개만 나타난 이유?
⑵pH를 일정하게 하고 phenol red의 양을 다르게 넣어줬을 때의 실험 결과분석
⑶phenol red의 값을 일정하게 하고, pH에 변화를 준 실험 결과의 분석
⑷Sephadex G-25-150을 사용한 이유?
⑸실험의 원리

5. Reference

본문내용

<예비보고서>
1. 실험제목 : Using gel filtration to study ligand - protein interactions
2. 실험목적 : serum albumin은 혈액 내에서 fatty acid 등의 중요한 영양분을 말초의 tissue까지 운반하면서 순환한다. ligand라고 불리는 transported molecule은 흔히 protein과 핵산의 선택된 binding site에 대해 특이한 친화성을 가진다. 이번 실험에서는 ligand - protein interaction의 반응동역학에 대해 bovine serum albumin과 dye phenol과의 binding을 이용하여 조사할 것이다. gel filtration technique은 dye protein complex를 분리하기 위해 사용될 것이다. 실험에서 얻어진 data는 binding curve 제작으로 분석될 것이다.
3. Contents
⑴Ligand binding by macromolecules
=>이번 실험에서의 gel filtration technique은 dynamic binding of small molecules by protein을 연구하기 위해 사용되어질 것이다. cell과 organism 사이에서는 많은 dynamic process가 일어나는데, 흔히 하나 또는 많은 smaller molecule과 macromolecules과의 binding을 포함한다.
①hormone의 action : hormone은 약하지만 특이성을 가진, hormone 분자와 targel cell의 membrane에 있는 receptor protein과의 interaction의 결과에 의해 response가 형성된다.
②enzyme의 조절 : small molecules은 특정 enzyme과 interaction을 이루어서 enzyme의 physical properties를 조절한다.
③Drug의 action : 혈액 내의 drug는 주로 plasma protein에 carrier와 같이 binding된다.

참고자료

· <예비보고서>
· expermental biochemisty, Rodney Boyer.// Merck index 12th ed.
· <결과보고서>
· - Modern Experimental Biochemistry, 3rd ed., Rodney Boyer.
· - Merck index, 12th ed., CambridgeSoft.
· - Biochemistry, 5th ed., Stryer, Berg, Tymoczko, Freeman publishing
· - Organic chemistry, 5th ed., John Mcmurry.
· - http://www.sigmaaldrich.com/catalog/search/ProductDetail?ProdNo=G25150&Brand=SIGMA
· - http://www.pbcpeptide.com/BSA.htm
· - http://www.chemistry.adelaide.edu.au/external/soc-rel/content/size-exc.htm