Thermotoga maritima 유래 내열성 cellulase B 융합단백질의 특성 규명 (Characterization of the recombinant cellulase B from Thermotoga maritima)

서지정보

· 발행기관 : 한국응용생명화학회
· 수록지 정보 : Journal of Applied Biological Chemistry / 65권 / 4호 / 383 ~ 386페이지
· 저자명 : 김정호

초록

Thermotoga maritima cellulose B 유전자의 The open reading frame (ORF)은 825 bp이고, cellulase B는 분자량이 약 31,732 kDa인 274개의 아미노산으로 구성되어 있다 이 중 N-말단의17개 아미노산은 signal peptide로 추정된다. Signal peptide를제외한 ORF를 pRSET 대장균 발현벡터에 삽입하여 pRBTmCelB 를 제조하였다. 6-His tag을 포함하는 TmCelB 융합단백질의cellulose 분해활성과 생화학적 특성을 분석하기 위해 pRBTmCelB 를 대장균 BL21에서 과다발현하였고 순수분리하였다. TmCelB 융합단백질은 cellulose 분해활성을 나타내었고 이 있는 것으로분석되었다. TmCelB 융합단백질은 약 95 oC 부근에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었고, 100 oC에서 최대 활성을 80% 이상 유지하는 것을 확인하였다. 또한 TmCelB 융합단백질은 약pH 4.5 부근에서 최대 활성을 나타내었고, pH 4.0-6.0 범위에서 최대 활성을 60% 이상 유지하였다. TmCelB 융합단백질은100 oC에서 180분 후에도 효소활성을 80% 이상 유지하였다.

영어초록

A gene encoding thermostable cellulase B (TmCelB) was isolated from Thermotoga maritima. The open reading frame (ORF) of TmCelB gene was 825bp long which predicted to encode 274 amino acid residues with a molecular weight of 31,732 Da. The 17 amino acid residues from N-terminal of the TmCelB was known as signal peptides. To analyze the enzymatic activity and biochemical properties, the ORF of TmCelB gene excluding a putative signal sequence encoding 17 amino acids were introduced into the E. coli expression vector, pRSET-B, and overexpressed in E. coli BL21. The optimum temperature of recombinant TmCelB was around 95 oC, and the optimum pH of recombinant TmCelB was around pH 4.5. The recombinant TmCelB was stable at temperature below 100 oC.

참고자료

· 없음