구아바･녹차잎 추출복합물(ILS-F-2301)의 기능성 원료 표준화를 위한 지표성분 Guaijaverin과 Epigallocatechin Gallate의 분석법 개발 및 검증 (Development and Validation of an Analytical Method of Guaijaverin and Epigallocatechin Gallate for the Standardization of Mixed Extracts of P. guajava and C. sinensis (ILS-F-2301) as a Functional Ingr)

서지정보

· 발행기관 : 한국식품영양과학회
· 수록지 정보 : 한국식품영양과학회지 / 52권 / 12호 / 1248 ~ 1255페이지
· 저자명 : 전영희, 박유진, 박세호, 김진수, 이지범

초록

본 연구에서는 HPLC를 이용하여 구아바･녹차잎 추출복합물(ILS-F-2301)을 기능성 원료로 개발하기 위한 원료 표준화의 일환으로 ILS-F-2301의 지표성분을 guaijaverin과 EGCG로 설정하고 이에 대한 HPLC 분석법을 확립하여 유효성 검증을 실시하였다. Guaijaverin과 EGCG의 분석을 위해 0.1% formic acid가 첨가된 물과 메탄올을 이동상으로 하고 C18 column을 사용하여 기울기 용리법으로 분리하고 각 물질의 최대흡수파장을 고려하여 254 nm(guaijaverin)와 280 nm(EGCG)에서 검출하였다. 분석법 유효성 검증은 특이성, 직선성, 정확성 및 정밀성 등을 통해 확인하였다. 표준용액과 ILS-F-2301의 피크 머무름시간과 UV spectrum이 일치하였으며, 다른 물질과 간섭없이 피크가 분리된 것으로 나타나 특이성을 확인하였다. Guaijaverin과 EGCG 검량선의 결정계수(R2)는 0.990 이상으로 높은 직선성을 보였으며, 검출한계는 guaijaverin이 0.44 μg/mL, EGCG가 21.44 μg/mL였고 정량한계는 guaijaverin이 1.32 μg/mL, EGCG가 64.97 μg/mL로 확인되었다. ILS-F-2301에 표준물질을 3개 농도로 첨가하고 분석한 회수율은 guaijaverin이 100.17~104.86%, EGCG가 97.92~99.40%로 나타나 정확성이 있는 것을 확인하였다. ILS-F-2301의 정밀도 측정 결과, guaijaverin과 EGCG의 상대표준편차(RSD)는 각각 0.39~1.38%, 0.16~0.52%로 나타나 본 분석법은 정밀성이 있음을 확인하였다. 이상의 결과로 ILS-F-2301의 지표성분인 guaijaverin과 EGCG의 HPLC 분석법이 신뢰성 있음을 검증하였다. 따라서 본 연구를 통해 확립된 시험법이 향후 ILS-F-2301의 원료 또는 제품의 품질관리를 위한 기초 자료로 활용될 것으로 기대된다.

영어초록

This study validated an analytical method using HPLC for the standard determination of guaijaverin and epigallocatechin gallate (EGCG) in mixed extracts of Psidium guajava and Camellia sinensis (ILS-F-2301) as functional ingredient. The analytical method of guaijaverin and EGCG was optimized by HPLC on a C18 column with a gradient elution of 0.1% aqueous formic acid and methanol at a flow rate of 0.8 mL/min. The analyte was detected at 254 and 280 nm. Validation of an analytical method was evaluated with respect to specificity, linearity, accuracy, and precision. Guaijaverin and EGCG were successfully separated with identical RT and UV spectrum without any interference substance, demonstrating that it presented specificity. Calibration curve of guaijaverin and EGCG exhibited high linearity (R2≥0.990). The limit of detection and quantitation of guaijaverin and EGCG were 0.44, 1.32 μg/mL and 21.44, 64.97 μg/mL, respectively. The recovery rate of guaijaverin and EGCG were obtained 100.17∼104.86% and 97.92∼99.40%, respectively, indicating that the result exhibited high accuracy. Relative standard deviation values in precision of guaijaverin and EGCG were 0.39∼1.38% and 0.16∼0.52%, respectively, showing that it appeared the excellent precision. Taken together, these results suggest that the developed HPLC method for the analysis of guaijaverin and EGCG in ILS-F-2301 is simple, efficient, and reliable. Also, it could be contributed to the quality control of ILS-F-2301.

참고자료

· 없음