국내산 인삼잎 유래 보체 활성화 다당체의 정제 및 화학적 특성 (Purification and Chemical Properties of Complement System-Activating Polysaccharides from the Leaf of Panax ginseng C.A. Meyer)

서지정보

· 발행기관 : 한국식품영양과학회
· 수록지 정보 : 한국식품영양과학회지 / 47권 / 5호 / 528 ~ 535페이지
· 저자명 : 신광순

초록

인삼잎으로부터 Cetavlon 처리 및 80% 에탄올 침전을 거쳐 얻어진 중성다당 GS-4의 항보체 활성의 활성 본체를 규명하기 위해 protease, periodate oxidation, chlorite 처리를 행하여 항보체 활성을 비교한 결과, GS-4의 항보체 활성은 protease 및 chlorite 처리에 의해 약간의 변화만을 나타낸 반면에 periodate 산화에 의해서는 미처리군 GS-4 대비 50% 이상의 급격한 활성 저하가 관찰되어 GS-4의 항보체 활성은 주로 다당 부위가 크게 관여하고 있다고 확인되었다. GS-4는 DEAE-Sepharose FF(Cl- form)와 Biogel P-30으로 연속적인 정제를 실시한 결과 고분자 다당 GS-4a-Ⅰ을 얻을 수 있었다. GS-4a-Ⅰ은 GS-4와 GS-4a의 항보체 활성과 비교하였을 때 상당히 높은 항보체 활성을 나타내었다. 또한, anti-human C3를 이용한 교차면역전기영동 실험과 Mg++과 Ca++ 이온의 존재 및 부재 상태에서의 항보체 활성 실험을 통해 인삼잎 유래 활성 다당 GS-4a-Ⅰ은 고전경로와 부경로 모두를 경유하여 보체계를 활성화시키고 있음이 최종 확인되었다. 우수한 항보체 활성을 나타낸 GS-4a-Ⅰ에 대한 일반화학적 특성을 분석한 결과 GS-4a-Ⅰ은 HPLC상에서 좌우대칭의 단일 peak 경향을 보였으며 약 14,400 Da의 분자량을 가지고 있었다. 또한, 일반 분석 및 구성당 분석을 통해 30.7%의 galactose와 22.5%의 arabinose를 포함하여 중성당 60.8%, 산성당 36.3%로 이루어진 다당체임을 최종 확인하였다.

영어초록

To develop new ingredients with biological functionality, discarded ginseng leaves (Panax ginseng C.A. Meyer) were used in this study. A neutral crude polysaccharide (GS-4) was isolated after a surfactant treatment and precipitation with an 80% ethanol solution. To determine if the high anti-complementary activity of GS-4 isolated from ginseng leaf was due to the polysaccharide, anti-complementary activity was examined after a treatment with protease, periodate oxidation, and chlorite. As a result, the anti-complementary activity was decreased significantly by periodate oxidation but changed slightly after a treatment with protease and chlorite. This result suggests that the anti-complementary activity by GS-4 is due mainly to the polysaccharide moiety. GS-4a-Ⅰ was purified from the crude polysaccharide (GS-4) from the leaf of P. ginseng C.A. Meyer by two subsequent column chromatography steps using DEAE-Sepharose FF and Bio-gel P-30. GS-4a-Ⅰ showed considerably high anti-complementary activity compared to GS-4 and GS-4a. Furthermore, the cross-immunoelectrophoresis using anti-human C3 serum and anti-complementary activity was carried out after incubation of normal human serum with GS-4a-Ⅰ in the presence or absence of Ca++. These results suggest that GS-4a-Ⅰ activates the complement system through an alternative pathway as well as the classical pathway. An analysis of the general chemical properties of complement-activating GS-4a-Ⅰ revealed a molecular weight of 14,400 Da. GS-4a-Ⅰ consisted mainly of 60.8% neutral sugar including 30.7% galactose and 22.5% arabinose, as well as 36.3% uronic acid through general analysis and component sugar analysis.

참고자료

· 없음