창이자 추출물이 아토피 피부염 유발 생쥐의 비장 세포 Th17의 세포분화 억제에 따른 아토피 피부 상태에 미치는 영향 (Studies of Xanthium strumarium extract suppressing Th17-cell differentiation and anti-dermatitic effect in BMAC-induced Atopy Dermatitis of NC/Nga Mice)

서지정보

· 발행기관 : 한국생물공학회
· 수록지 정보 : KSBB Journal / 24권 / 4호 / 383 ~ 392페이지
· 저자명 : 김금란, 최태부

초록

아토피피부염 (AD)은 천식, 음식 알레르기, 비염 같은
전신아토피질환을 동반하는 만성재발성 피부염증질환이다.
아토피피부염과 관련된 IL-17의 임상적 역할은 다양한 조
건에서 보고되고 있으며, 또한 건선 피부 상태에 깊숙이
관여하고 있다. IL-17은 각질세포 (keratinocytes)에서 과잉
으로 생산되며, 아토피피부염의 말초임파구에서도 다량 생성
됨을 세포내염색을 통하여 확인된 바 있다. 본 연구에서는
창이자 추출물 (XS-E와 XS-FL)이 NC/Nga 생쥐의 CD4+
T 세포에서 유도된 Th17 세포의 분화억제 및 IL-17의 생
산량 감소 효과에 대한 실험을 하였다. 그 결과 XS-E와
XS-FL을 처리한 섬유아세포에서 세포독성은 나타나지
않았고, 4일간 XS-E와 XS-FL에 동시배양 한 CD4+ T 세포
의 IL-17 생산량을 FACS로 분석한 결과 100 μg/mL XS-E
처리군의 IL-17 생산량은 32.3%로 대조군에 비하여 2배
이상의 감소를 나타내었으며, 20 μg/mL XS-30% AFL
(acetone XS-FL) 처리군의 Th17 세포는 19.6%으로 대조군
에 비하여 3.5배 억제되었다. 또한 real-time PCR을 이용하여
IL-17A와 IL-22 mRNA의 유전자 발현량을 비교 분석한
결과, IL-17A와 IL-22 mRNA의 유전자발현의 RQ값
은 XS-E와 XS-30% AFL를 처리한 실험군이 대조군에 비하
여 유의성 있는 감소를 나타내었다(p < 0.01, p < 0.001).
ELISA로 측정한 IL-17A 생산량은 XS-E와 XS-30% AFL를
처리한 실험군이 대조군에 비하여 현저히 감소 (p < 0.05,
p < 0.001)하였다. Th17 세포의 증식을 알아보기 위하여,
rIL-6와 TGF-β로 분화시킨 Th17 세포를 CFSE로 표지한
후 rIL-23 처리를 하여 4일간 배양하여 증식을 유도시켰
다. 대조군의 Th17 세포 분열은 4일 동안 4번에 걸쳐 비슷
한 세포수의 증식이 일어나는 것을 CFSE를 통하여 확인
하였고, XS-30% AFL 처리군은 CFSE의 형광 분포가 점점
감소하여 Th17 세포의 증식이 억제됨을 알 수 있었다.

영어초록

Xanthii fructus which is well known as “Chang-ihjah” in Korea is the dried fruit of Xanthium strumarium L. (or Xanthium
sibiricum PATR. Ex WIDD., Asteraceae. XS). Water extract of this fruit has been used for treatment of various inflammatory
diseases such as tympanitis, allergic rhinitis, or ozena as alternative therapy material usually by oral administration in far
Eastern countries including Korea. In this study, the effect of XS extract (XS-E) or XS-30% acetone fraction layer (XS-30%
AFL) on the differentiation of CD4+ T cells isolated from NC/Nga mouse and the production of IL-17 was investigated. The
experimental results showed that 100 μg/mL of XS-E could decrease the production of IL-17 by CD4+ Th17 cells by 2 fold
and only 20 μg/mL of XS-30% AFL could inhibit 3.5 fold. The amount of IL-17A and IL-22 mRNA determined by real-time
PCR was decreased remarkably when XS-E or XS-30% AFL was treated on CD4+ Th17 cells(p<0.01, p<0.001). The amount
of IL-17A protein determined by ELISA was also decreased remarkably(p<0.05, p<0.001). To study the effect of XS-E or
XS-30% AFL on the proliferation of Th17 cells, CD4+ T cells of a NC/Nga mouse was firstly differentiated by rIL-6/TGF-β
and then stimulated by rIL-23. The control group of Th17 cells were doubled every each day, while those of XS-E or XS-30%
AFL treated group were shown to be delayed remarkably by these extracts. In conclusion, XS can inhibit the differentiation
of Th17 cells of NC/Nga mouse and the production of IL-17 successfully, which may be a beneficial result for the treatment
of atopic skin dermatitis.

참고자료

· 없음