RAW264.7 대식세포에서 MAPK 및 NF-κB 신호전달 억제를 통한 rebaudioside A의 항염 효과 (Anti-inflammation effect of rebaudioside A by inhibition of the MAPK and NF-κB signal pathway in RAW264.7 macrophage)

서지정보

· 발행기관 : 한국응용생명화학회
· 수록지 정보 : Journal of Applied Biological Chemistry / 61권 / 2호 / 205 ~ 211페이지
· 저자명 : 최다희, 조욱민, 황형서

초록

리바우디오사이드 A는 Stevia rebaudiana Bertoni에서 분리된천연감미료로 널리 알려진 스테비올배당체 중 하나이다. 최근연구에서 LPS 자극에 의해 활성화된 RAW264.7 마우스 대식세포에서 리바우디오사이드 A가 인터루킨-1α/1β 같은 염증성사이토카인 분비를 억제하는 기능이 확인되었다. 그러나 LPS처리 시 리바우디오사이드 A의 항염 활성에 대한염증 억제기작은 정확히 제시하지 못하였다. 따라서 본 연구에서는 리바우디오사이드 A의 LPS 신호전달 메카니즘에서의 항염증 효능을 단백질 수준에서 규명하고자 하였다. NO 생성에 관여하는 iNOS 단백질 발현양을 분석한 결과 리바우디오사이드 A의 250 μM 처리군에서 농도 의존적으로 단백질 발현이 감소하는 것을 확인하였다. 또한 염증 신호에 의한 대표적 핵 전사 인자인 NF- κB의 mRNA 발현량 분석 결과에서도 LPS 처리군에 비해 그발현양이 감소하였다. 또한 세포질에 존재하는 NF-κB와 I-κB 복합체는 LPS신호에 의한 I-κB의 인산화 및 ubiquitination로인해 NF-κB가 이탈되기 때문에, 리바우디오사이드 A에 의한pNF-κB, pI-κB의 단백질 발현을 비교 분석한 결과 NF-κB 단백질의 인산화가 농도 의존적으로 감소하였고, I-κB의 인산화또한 저해되는 것을 확인 하였다. 최종적으로 리바우디오사이드A는 LPS처리 조건에서 MAPK중 특이적으로 extracellular signal-regulated kinase (ERK1/2)의 인산화를 농도 의존 방식으로 감소시킴으로써 NF-κB 조절 기작에 관여함을 알 수 있었다.
따라서 본 연구 결과들을 통해 우리는 리바우디오사이드 A가RAW264.7 세포에서 LPS에 의해 활성화 되는 MAPK 및 NF- κB의 발현 억제를 통해 염증이 억제될 수 있음을 확인하였다.

영어초록

Rebaudioside A is a natural sweetener isolated from Stevia rebaudiana Bertoni, one of the glycosides based on steviol.
Recent studies have shown that rebaudioside A inhibits the inflammatory response by inhibiting cytokines secretion such as interleukin-1α/1β in activated RAW264.7 mouse macrophage cells by LPS. However, the inhibitory mechanism of inflammation by rebaudioside A in the presence of LPS has not been fully elucidated. Therefore, in this study, we tried to investigate the antiinflammatory activity of rebaudioside A at the protein level when RAW264.7 cells were stimulated by LPS. The inducible nitric oxide synthase protein expression level was reduced in the group treated with 250 μM rebaudioside A compared to the LPS-treated group. In addition, the mRNA expression level of NF-κB, which is a representative nuclear transcription factor by inflammatory signal, was also decreased as compared with that of LPS-treated group. In addition, NF-κB and inhibitor-κB (I-κB) complexes that are known to be dissociated by I-κB phosphorylation and ubiquitination were less phosphorylated than LPS treated group in the presence rebaudioside A. Finally, we could find that rebaudioside A was involved in the NF-κB pathway through reducing extracellular signal-regulated kinase1/2 phosphorylation in a concentration-dependent manner. These results suggest that rebaudioside A might suppress inflammatory reaction through MAPK and NF-κB regulation in LPS-stimulated RAW264.7.

참고자료

· 없음