댜양한 율피 원료 중 엘라그산 함량분석을 위한 분석법 검증 (Validation of Analytical Methods for Ellagic Acid Content Analysis of Various Castanea crenata Inner Shell Raw Materials)

서지정보

· 발행기관 : 한국식품위생안전성학회
· 수록지 정보 : 한국식품위생안전성학회지 / 39권 / 6호 / 501 ~ 508페이지
· 저자명 : 서수현, 김보름, 양세은, 김정복

초록

본 연구에서는 기존 율피 중에 존재하는 ellagic acid 정 량 할 수 있는 분석법을 확립하였다. 본 실험에서 사용된 밤과 율피, 율피 가루는 2023년 10월 서울 소재 전통 및 약령시장에서 구입하였다. 실험에서 사용된 밤 품종은 국 내에서 소비되는 품종으로 서산, 옥광, 이평, 석추, 중국산 을 구입하여 사용하였고, 가공된 율피와 율피가루의 원산 지는 공주, 아산지역의 제품을 구입하여 실험을 진행했다. 율피중에 존재하는 ellagic acid의 함량은 100% methanol 에서 0.077 mg/g으로 가장 높게 검출되었고, 50% methanol과 ethanol에서 0.048 mg/g, 증류수에서는 0.011 mg/g로 확인되었다. 유기용매에 비율이 낮을수록 ellagic acid의 함량은 순차적으로 줄어듬을 확인하였다. Waters사의 HPLC이용하였으며 분석용 컬럼은 Aegispak C18-L을 사용하였고, 이동상은 A (1.2% phosphoric acid in DW)와 B(methanol)를 이용하여 gradient 를 사용하였다. 유속은1.0 mL/min, 주입량은 10 μL, 컬럼 오븐은 35oC이였다. 검량선 작성을 위해 1-50 g/mL 범위에서 상관계수(R2) 0.9999이상의 직선성을 확인하였다. 검량선내 3개 농도를 이용하여 정밀도와 정확성을 측정한 결과, 일내 정밀도는 0.09-0.18%, 정확도는 99.9-105.8%, 일간 정밀도는 0.04-0.23%,정확도는 99.8-105.9% 범위내로 확인되었다. 국내에 유통되고 있는 시료 8가지 품종의 정보는 Table 10과 같이 정리하였고, 확보된 시료를 분석한 결과 총 8개 시료에서ellagic acid의 함량은 0.0002-0.0936 mg/g로 확인되었다.
Ellagic acid의 검출 한계는 3개 시료에서 검출한계 0.016 μg/mL, 정량한계 0.499 μg/mL로 확인되었다. Ellagic acid 측정불확도 산출 결과 0.40±0.01 mg/kg (신뢰수준 95%, K=2)로비교적 낮은 측정불확도 값을 산출하였다. 따라서 본 연구에서는 율피 중 ellagic acid 정성 및 정량분석을 위해유효성이 검증된 분석법 확립으로 인하여 율피 중 ellagicacid의 기준규격 설정 및 관리에 참고 자료가 될 수 있고,향후 ellagic acid를 이용한 건강기능식품 개발에 있어 품종,지역 및 추출용매에 따른 실험결과를 바탕으로 건강기능식품 기준규격 관리와 활성 및 독성시험 연구의 근거 자료가 될 수 있다고 판단된다.

영어초록

Ellagic acid is a polythene compound found in fruit and nutshell derived food extracts. According to previous reports, ellagic acid displays anticancer, anti-inflammatory, and antidiabetic effects. A major component of castanea crenata inner shell is ellagic acid. We confirmed the presence of ellagic acid in inner shell samples using solvents including distilled water, methanol, and ethanol. Ethanol and methanol yielded the best extraction results. In developing a high-performance liquid chromatography (HPLC) with UV-Vis spectrophotometer (UV/Vis) based analytical method for ellagic acid in foods, we found that a C18 column yielded the best resolution among all tested columns and mobile phases. We also performed method validation, including linearity, inter-day, intra-day, precision, accuracy, limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ). We established a calibration curve spanning 1 µg/ mL to 50 µg/mL with a satisfactory coefficient of determination of 0.9999. The precision and accuracy of ellagic acid from spiked samples at levels of 2, 5, and 50 µg/mL ranged from 0.04 to 0.23% with relative standard deviations (RSD) between 99.8 and 105.9%. The detection limit was 0.165 μg/mL and the Limit of Quantitation was 0.499 μg/ mL. The ellagic acid concentration in C. crenata inner shells was 0.002-0.0936 mg/g.

참고자료

· 없음