꿀벌 병원성 바이러스의 정량적 검출을 위한 정량 실시간 재조합효소-중합효소 증폭법의 개발 (Development of Quantitative Real-time Recombinase Polymerase Amplification (qRT-RPA) Method for Quantitative Detection against Pathogenic Virus in Honeybee)

서지정보

· 발행기관 : 한국양봉학회
· 수록지 정보 : Journal of Apiculture / 31권 / 2호 / 147 ~ 156페이지
· 저자명 : 민상현, 윤병수, 왕지희, 임수진, 이칠우

초록

재조합효소-중합효소 증폭법(RPA)은 등온에서 매우 빠른 반응속도를 보이는 유전자 증폭법으로 근래여러 병원체의 검출법에 폭넓게 적용되고 있다. 본연구는 kSBV의 빠른 검색을 위하여 kSBV 특이 실시간재조합효소-중합효소 증폭법을 새로이 개발하였으며, 특이 cDNA로부터 2분 46초만에 kSBV특이 유전자의 존재를 확인할 수 있었다. 또한, 이를 바탕으로 목적 유전자의 정량이 가능한, 보편적 응용이 가능한정량 실시간 재조합효소-중합효소 증폭법(quantitative real-time RPA)을 제안하였으며, 이 정량법이 현장시료에서 유용함을 입증하였다. 본 실험법은 꿀벌 질병체의 정량 검출 뿐 아니라, 일반 병원체의 정량 검출에서도 응용되기를 기대한다.

영어초록

Recombinase polymerase amplification (RPA) is a specific DNA amplification method which shows high speed in isothermal condition and it has been widely applied to the detection of various pathogens. In this study, kSBV specific real-time recombinase polymerase amplification method was newly developed for rapid detection of kSBV. The existence of kSBV specific gene could be detected using total cDNA within 2 min 46 sec using this method. Based on this method, we proposed the quantitative real-time recombinase polymerase amplification which was able to quantify the target gene and to be applied universally. Moreover, this assay was proved to be useful to detect the pathogen from real samples. It is expected that this assay will be applied as quantitative detection method for general pathogens as well as honeybee pathogens.

참고자료

· 없음