삼채․강황 복합추출물의 기능성 원료 표준화를 위한 HPLC 분석법 검증 (The validation of HPLC analytical method for Allium hookeri Thwaites and Curcuma longa complex extract as functional ingredients)

서지정보

· 발행기관 : 한국식품저장유통학회
· 수록지 정보 : Food Science and Preservation / 27권 / 3호 / 356 ~ 362페이지
· 저자명 : 최은진, 오교녀, 홍지애, 정창식, 임소정, 김초인, 이슬기, 최철웅

초록

삼채․강황복합 추출물 골관절개선 건강기능식품 개발을 위해 선행연구로 air pouch arthritis 동물모델 및 adjuvant rhtumatoid arthritis 동물모델을 이용하여 삼채와 강황 복합추출물 비율별(3:7, 5:5, 7:3) 골관절 개선 효능을 검색한 결과, 삼채․강황 7:3 비율의 복합 추출물에서 골관절 개선 효능이 있는 것을 확인하였다(data not shown). 위 결과를 바탕으로 삼채․강황 7:3 비율의 복합 추출물 원료의 표준화를 위한 p-coumaric acid 함량 및 분석법 검증을 실시하였다. 분석법 검증결과, HPLC를 이용한 분석방법에서 표준용액의 피크 유지 시간과 삼채․강황의 7:3 복합 추출물의 피크 유지 시간이 일치하였으며, 동일한 spectrum을 나타내는 것으로 특이성을 확인하였다. p-Coumaric acid의 검량선은 각각 1.0, 0.999, 0.999로 1에 가까운 높은 직선성을 보여주어 분석에 적합함을 알 수 있었다. p-coumaric acid의 검출한계(LOD)는 0.082 μg/mL이었고, 정량한계(LOQ)는 0.249 μg/mL로 설정되었다. 정확성에서는 97.74±0.009–101.02±0.024로 높은 수준의 p-coumaric acid 회수율을 보였으며, 평균분석오차 0.013%로서 기순인 10% 이내를 만족하였다. 또한, 반복성에서는 평균 106.8±0.4로 RSD 0.4%를 나타내었고, 실험실 내 정밀성에서 RSD 0.2%, 완건성에서는 RSD 4.8, 0.3, 3.6%를 나타내는 것을 확인하였다. 한편, 삼채․강황 복합 추출물 중에는 지표성분인 p-coumaric acid가 2.3±0.09%(RSD 3.8%) 함유되어 있는 것으로 확인되었다. 이상의 실험결과, 삼채․강황 복합 추출물의 골관절개선 건강기능식품 지표성분인 p-coumaric acid의 HPLC-UV 분석방법은 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 반복성, 완건성 등의 모든 항목에서 validation 기준에 적합한 시험 방법으로 확인되었다.

영어초록

This study was preformed to establish a simple and reliable HPLC/UV analytical method to determine p-coumaric acid contents for the standardization of water extracts of Allium hookeri and Curcuma longa complex as functional health food ingredients. The quantitative HPLC method was optimized using a reversed-phase C18 column at 35℃ with methanol and H2O (30:70, v/v) as the gradient mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min and along with detection wavelength of UV 300 nm. This HPLC/UV analytical method exhibited good specificity and high linearity in the tested range of 1.0–10.0 mg/mL with excellent coefficient of determination (R2) of 1.0. The limit of detection and limit of quantification were 0.08 and 0.24 μg/mL, respectively. In addition, the relative standard deviation values from the intra and inter-day precision measurements were 0.4 and 0.1%, respectively. These results indicate that the established HPLC/UV analytical method is simple, specific, precise, accurate, and reproducible and so could be employed in the quantitative analysis of p-coumaric acid as a functional compound in Allium hookeri Thwaites and Curcuma longa complex.

참고자료

· 없음