형질전환 벼 현탁세포를 이용한 hCTLA4Ig 생산에서 proline과 gelatin이 미치는 영향 (Effects of Proline and Gelatin on hCTLA4Ig Production in Transgenic Rice Suspension Cells)

서지정보

· 발행기관 : 한국생물공학회
· 수록지 정보 : KSBB Journal / 24권 / 3호 / 246 ~ 252페이지
· 저자명 : 송미나, 전수환, 권준영, 최성훈, 김동일

초록

본 연구에서는 형질전환된 벼 세포를 이용하여 자가면역
질환의 치료제인 human cytotoxic T-lymphocyte antigen
4-immunoglobulin (hCTLA4Ig)을 생산하였고, RAmy3D
promoter와 RAmy1A signal peptide를 사용하여 당 고갈
시에 목적 단백질의 발현과 배지로의 분비를 유도하였다.
이 시스템의 문제점은 당 고갈에 의해 목적 단백질의 생산
이 유도되기 때문에 에너지원이 없어 세포의 사멸, 이로
인한 배지내로의 protease 분비를 유발하게 된다. 이것은
목적 단백질의 안정성 저해와 궁극적으로는 생산성의 손실
을 일으킨다. 따라서 세포를 보호하여 사멸을 막는 효과가
있음이 보고된 proline을 첨가하여 생산성 증진 효과를
확인하고자 하였다. 4 mM의 proline을 첨가하여 배양하였
을 때, 세포의 사멸 및 protease의 분비를 줄일 수 있었고
이는 결과적으로 hCTLA4Ig의 생산성 증진으로 이어졌다.
또한 단백질 안정제를 통하여 배지내로 분비된 hCTLA4Ig
의 안정화를 이루어 생산성을 높이고자 하였다. 0.01 g/L
의 gelatin을 적용하여 생산성 증진 효과를 확인하였으며,
이는 hCTLA4Ig의 안정화에 의한 것임을 알 수 있었다.
Protease의 분비를 줄이기 위한 세포 보호와 protease의
공격을 막기 위한 hCTLA4Ig 보호를 통하여 형질전환된
벼 세포를 이용한 hCTLA4Ig의 안정성 및 생산성을 증대
시킬 수 있음을 확인하였다.

영어초록

Rice cells were transformed to express human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig)
using RAmy3D promoter. hCTLA4Ig was produced and secreted into culture media inducibly when sugar was
depleted. The obstacles of this system are the cell death and release of proteases by sugar starvation. These
problems resulted in the losses of stability and productivity of hCTLA4Ig. Therefore, the effects of proline as
an inhibitor of cell death were investigated. When 4 mM proline was added in sugar-free media, the cell death
and release of proteases were reduced. As a consequence, the production of hCTLA4Ig was enhanced. In
addition, the effects of protein stabilizers such as gelling agents were studied. It was found that the application
of 0.01 g/L gelatin led to an increase in hCTLA4Ig production. This increase might be originated from the
stabilization of hCTLA4Ig. In conclusion, the production of hCTLA4Ig could be enhanced by the additions of
proline and gelatin in transgenic rice cell cultures.

참고자료

· 없음