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용균과 DNA 패키징 유전자가 결핍된 온도 민감성 박테리오 파아지 람다 시스템에서 재조합 단백질 생산성에 미치는 온도의 영향

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최초등록일 2025.05.06 최종저작일 2005.04
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용균과 DNA 패키징 유전자가 결핍된 온도 민감성 박테리오 파아지 람다 시스템에서 재조합 단백질 생산성에 미치는 온도의 영향
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    서지정보

    · 발행기관 : 한국생물공학회
    · 수록지 정보 : KSBB Journal / 20권 / 2호 / 112 ~ 115페이지
    · 저자명 : 박태현, 오정석

    초록

    본 연구는 장시간의 산업적인 연속 배양에서 문제가 되는 플라즈미드 불안정성을 극복하기 위해서 박테리오 파아지 람다를 벡터로 이용하였다. 또한, 벡터의 안정성과 생산성을 높이기 위해서 용균과 λ DNA 패키징이 결핍된 돌연변이 람다를 선별하였다. 이 돌연변이 람다는 온도 전환에 의해서 단백질이 생산되는 온도 민감성 돌연변이 cI 유전자를 가지고 있기 때문에 재조합 단백질 생산, λ DNA 복제, 숙주 세포의 안정성 등이 lytic 상태로의 전환을 유도하는 온도에 영향을 받게 된다. 36℃의 배양 온도는 lytic으로 전환이 잘 되지 않았고, 40℃ 이상의 배양 온도는 완전한 lytic 상태를 유도하였다. 그러나 42℃의 배양 온도에서는 생산성이 감소되는 온도 저해 효과가 관찰되었다. 온도가 증가 할수록 박테리오 파아지가 들어 있지 않는 대장균의 수는 증가하였고, 이것은 새로운 파아지를 만들 수 있는 박테리오 파이지를 사용하여 재감염을 시키면 완화될 수 있을 것으로 예상된다. 결과적으로 단위 세포당 발현량은 40℃에서 최대를 나타내었고, 안정성이나 총 발현량의 관점에서는 38℃가 최적의 온도로 관찰되었다.

    참고자료

    · 없음
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