배주배양 세포로부터 감귤 식물체의 획득 및 감귤 트리스테자 바이러스 무병주 검증 (Production of Citrus Plants from Ovule Cell Culture and Verification of CTV - free Plants)

서지정보

· 발행기관 : 한국원예학회
· 수록지 정보 : 원예과학기술지 / 35권 / 1호 / 121 ~ 130페이지
· 저자명 : 진성범, 박재호, 박석만, 이동훈, 윤수현

초록

본 실험은 우량 감귤품종 육성을 위한 바이러스 프리인 배주배양 세포의 재료 공급을 목적으로 실시하였다. 감귤 트리스테자 바이러스(CTV)에 감염된 것으로 추정되는 제주도 재래감귤 3품종(동정귤, 청귤, 지각) 그리고 온주밀감 2품종(궁천조생, 하례조생)의 미숙과실 내 수정되지 않은 배주를 malt extract 500mg·L-1, sucrose 50g·L-1, kinetin 1.0mg·L-1 그리고 agar 8g·L-1가 첨가된 MS2 배지에 치상하여 4주 후 각각 10, 21, 13, 5, 7개의 체세포 배를 얻었고, 체세포배 주변에서 white 캘러스 세포의유도는 각각 2, 4, 2, 4, 5개를 얻었다. 얻어진 캘러스 세포로부터 체세포배의 유도는 MT 기본배지에 malt extract 500mg·L-1,lactose70g·L-1 그리고 agar 16g·L-1가 첨가된 배지로 옮겨 6주 후 재분화능 체세포배를 얻었다. 재래감귤의 재분화능 체세포배는 MS 기본배지에 malt extract 500mg·L-1, sucrose 50g·L-1그리고 agar 8g·L-1이 첨가된 배지로 옮겨 약 10주 후 약 60% 이상의정상적인 유식물체를 얻었다. 반면 온주밀감 2품종은 MT 기본배지에 sorbitol 1.0M, galactose 1.0M, GA3 1.0mg·L-1 그리고gelrite 3g·L-1가 첨가된 배지에서 정상적인 유식물체를 얻었다. 배주배양 세포로부터 유도된 식물체들의 무병주 여부는 RT ‚PCR과 혈청학적 진단법을 이용하여 무병주임을 확인하였다. 본 연구결과는 생명공학기법에 바이러스 프리인 감귤 세포를이용함으로써 우량 감귤 품종을 육성할 수 있을 것으로 기대된다 .

영어초록

This study was carried out to investigate a method for producing cultured virus - free ovules forbreeding high - quality Citrus cultivars. Ovules from the immature fruits of three citrus cultivarsnative to Jeju (Dongjeongkyool, Cheongkyool, and Jikak) and two cultivars of Citrus unshiuMarc. (Miyagawa wase and Haryejosaeng) that were thought to be infected with Citrus tristezavirus (CTV) were cultured on MS2 medium (Murashige - Skoog [MS] basal medium containing500 mg·L-1 malt extract, 50 g·L-1 sucrose, 1.0 mg·L-1 kinetin, and 8 g·L-1 agar). After four weeks ofculture, 10, 21, 13, 5, and 7 somatic embryos and 2, 4, 2, 4, and 5 white callus cells (surroundinggreen somatic embryos) were obtained from Dongjeongkyool, Cheongkyool, Jikak, Miyagawawase, and Haryejosaeng, respectively. After six weeks of culture, somatic embryos were obtainedfrom cultured cells grown on MT basal medium supplemented with malt extract (500 mg·L-1),lactose (70 g·L-1), and agar (16 g·L-1). Over 60% of the somatic embryos from citrus cultivarsnative to Jeju developed into normal plants on MS basal medium supplemented with malt extract(500 mg·L-1), sucrose (50 g·L-1), and agar (8 g·L-1) after 10 weeks of culture. Normal plants wereregenerated from two Citrus unshiu Marc. cultivars on MT basal medium supplemented withsorbitol (1.0 M), galactose (1.0 M), GA3 (1.0 mg·L-1), and Gelrite (3 g·L-1). The absence of virusin plants generated from cultured ovules was confirmed by RT - PCR and antigen - antibodyreactions. Therefore, virus - free Citrus cells can be obtained for breeding high - quality citruscultivars using the biotechnological technique evaluated in this study.

참고자료

· 없음