간질환의 유전자치료를 위한 효과적인 아데노바이러스벡터의 간내 전달방법으로서 젤폼절편을 사용한 간동맥색전술의 유용성: 개에서의 예비 동물 실험

서지정보

· 발행기관 : 대한영상의학회
· 수록지 정보 : 대한영상의학회지 / 48권 / 2호 / 131 ~ 139페이지
· 저자명 : 이진화, 박병호, 김찬성

초록

목적: 아데노바이러스매개체는 간세포와 같이 정지세포에 침투하여 유전자물질을 전달할 수 있는 좋은 매개체이다. 하지만 높은 농도의 아데노바이러스매개체의 사용은 간독성과 심한 면역반응을 나타내기도 한다. 이에 부작용을 최소화 할 수 있는 적은 농도의 아데노바이러스매개체를 임상에서 널리 사용하고 있는 간동맥색전법으로 효과적인 간내 전달이 이루어지는지를 알아보고자 하였다.
대상과 방법: 인형 아데노바이러스 제5형을 이용하여 바이러스가 복제에 필요한 유전자인 E1부분을 제거하고 E1 부분에 β-galactosidase 유전자를 넣어, 자가 복제가 불가능한 바이러스로 재조합하고, 293 세포주에서 증폭시켜 정제한 adv.CMV.LacZ(이하 LacZ-adv)를 실험동물 한 마리 당 2×1011 particles/kg의 농도로 준비하였다. 몸무게 10 kg 전후의 잡종 개 두 마리를 좌간엽동맥에 주입하는 젤폼절편의 크기(3×2×2 mm, 2×1×1 mm)에 따라 실험개-I, II로 분류하였고, 전신마취하에 좌간엽동맥을 3F 미세카테터로 초선택하였다. 준비된 LacZadv를 젤폼절편에 완전흡수시켜 선택된 좌간동맥으로 주입하여 좌간동맥이 색전이 이루어지도록 하였다. 비슷한 몸무개의 잡종개 한 마리는 대조실험개(실험개-III)로 젤폼절편없이 LacZ-adv만을 좌간동맥내로 주입하였다. 시술 전, 하루, 3일에 혈액학적 병리소견을 얻기 위해 채혈하고, 3일 후에 안락사시켜 간조직을 얻은 뒤, 간의 각 절편에서 X-gal 염색을 하여 간세포내 유전자전달에 의한 염색 유무, 염색 정도를 병리학자가 판단하였다.
결과: 젤폼절편의 크기가 큰 실험개-I은 X-gal 염색이 간문 근처의 큰혈관 주위의 간세포에 덩어리져 염색되었고, 작은 크기의 젤폼절편의 실험개-II는 간 전체에 걸쳐 골고루 X-gal 염색이 되는 것을 발견할 수 있었다. 그러나 간동맥 색전없이 LacZ-adv를 주입한 대조실험개(실험개-III)의 간은 X-gal에 염색되는 간세포를 발견하기 힘들었다. 실험개-I, II, III 모두 현미경시야에서 간세포의 괴사나 염증반응은 발견할 수 없었고, 혈액검사 소견상 염증반응을 나타내는 소견은 보이지 않았다. 혈청학적 간기능 검사에서 SGOT, SGPT 수치가 시술 1일째 약간 증가하였으나, 시술 3일째는 시술 이전의 상태로 회복되었다.
결론: 젤폼절편의 크기를 작게하여 실시한 간동맥색전술은 LacZ-adv의 간내 전달방법으로 아주 효과적이며, 안전한 방법이라고 생각된다.

참고자료

· 없음