Bacillus sp. 유래 β-Mannanase의 정제 및 Picea abies Galactosyl Glucomannan 가수분해 올리고당의 중합도별 Bifidobacterium spp.에 대한 생육활성

서지정보

· 발행기관 : 한국산업식품공학회
· 수록지 정보 : 산업식품공학 / 18권 / 4호
· 저자명 : 이명석, 박영서, 박귀근

목차

Abstract
서 론
재료 및 방법
기질 조제법
Bacillus sp. 유래 β-mannanase의 생산
β-Mannanase의 활성 측정
환원당의 정량
효소정제 및 SDS 전기영동법
당의 형광유도체화
당의 전기영동(Fluorophore Assisted Carbohydrate Electrophoresis, FACE)
Galactosyl glucomannan 가수분해 올리고당의 분리 및 thin layer chromatography(TLC)
Timell 방법에 따른 중합도
중합도별 가수분해 올리고당의 Bifidobacterium spp.에 대한 생육활성
결과 및 고찰
DEAE sephadex chromatography에 의한 효소 정제
Picea abies 유래 galactosyl glucomannan 가수분해 올리고당의 분리 및 중합도 결정
중합도별 galactosyl glucomannan 가수분해 올리고당의 Bifidobacterium spp.에 대한 생육활성
요 약
References

초록

DEAE Sephadex column chromatography에 의해 Bacillussp. 유래 β-mannanase의 정제를 수행하여 비활성 21.57units/mL 정제배율 95.33배를 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 단일밴드를 확인하였고, 분자량은 38.9kDa으로 결정되었다.정제효소에 의해 Picea abies galactosyl glucomannan을 가수분해하여 activated carbon column chromatography에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC, FACE 및Timell’s method에 의해 중합도 8, 10으로 결정되었으며,Penicillum purpurogenum유래 정제 β-mannanase와 α-galactosidase를 이용한 enzymatic sequential action에 의해 2가지 가수분해산물 모두 hetero type galactosylglucomannooligosaccharides로 확인되었다. B. longum, B.bifidum, B. infantis, B. animalis, B. breve, B. adolessentis,B. auglutum의 생육활성에 대한 중합도 8, 10의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS 배지상에 탄소원으로 중합도8, 10를 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. animalis에서는 중합도 8 galactosyl glucomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 표준 MRS 배지와 비교하여 19.5배, 중합도 10에서 18.7배의 가장 우수한 생육활성을 나타내었으며, B. bifidum에 대해서는 중합도 8의 경우 15.3배와 중합도10에서 14.3배 그리고 B. longum에서는 중합도 8 galactosylglucomannooligosaccharide를 탄소원으로 대체한 경우 표준MRS배지와 비교하여 중합도 8에서 15.2배, 중합도 10에서13.9배의 상대활성을 우선적으로 나타내었다.

영어초록

β-Mannanase from Bacillus sp. was purified by DEAE sephadex column chromatography. The specific activity ofthe purified enzyme was 21.57 units/mg protein, representing an 95.33-fold purification of the original crude extract.The final enzyme preparation obtained showed a single band on the SDS-PAGE and its molecular weight was esti-mated to be 38.9 kDa. Galactosyl glucomannan from Picea abies was hydrolyzed using the purified β-mannanase,and then the hydrolysates were separated by activated carbon column chromatography. The main hydrolysates werecomposed of galactosyl glucomannooligosaccharides with a degree of polymerization (DP) of 8 and 10. To investi-gate the effects of Picea abies galactosyl glucomannanooligosaccharides on the growth of the following: Bifidobac-terium longum, B. bifidum, B. animalis, B. breve, B. infantis, B. adolescentis, and B. auglutum, each Bifidobacteriumspp. was cultivated into the modified-MRS medium containing galactosyl glucomannooligosaccharides with DP 8 or10 as a carbon source. The growth of B. animalis increased 19.5-fold and 18.7-fold by the treatment of galactosylglucomannooligosaccharides with DP 8 and 10, respectively, compared to that of the standard MRS medium. B. bifi-dum grew 15.3 and 14.3-fold and B. longum grew 15.2 and 13.9-fold by the treatment of galactosyl glucomannoo-ligosaccharides with DP 8 and 10, respectively. Especially, galactosyl glucomannooligosaccharides with DP 8 wasmore effective than that with DP 10 on the growth of B. animalis, B. bifidum and B. longum.

참고자료

· 없음