아주대 생명과학실험-Plasmid DNA 추출

소개

아주대학교 생명과학실험 보고서입니다. 계절학기에 수강하여 최종 성적 A 받았습니다. 제가 직접 작성한 보고서로, 완전히 베끼지 않고 참고하여 고찰 부분 작성하면 좋을 것 같습니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론
2.1 세포에 따른 DNA의 위치
2.2 Plasmid DNA
2.3 제한효소
2.4 Plasmid DNA 추출 및 정제
2.5 Agarose gel 전기영동

3. 실험재료&방법

4. 실험 결과

5. 고찰

6. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
플라스미드(plasmid)라는 염색체 이외의 자가복제 DNA를 분리하여 DNA의 추출 및 정제 방법의 원리를 배우고, DNA 전기 영동으로 DNA의 이화학적 특성을 이해한다.
2. 실험 이론
1) 세포에 따른 DNA의 위치
세포는 세포핵을 가지는 진핵 세포와 세포핵이 없는 원핵 세포의 두가지 유형으로 크게 나눌 수 있다. 원생 생물은 단세포 생물로 핵막이 없고, 세포의 크기가 1~10μm로 작다. 세포벽이 대부분 존재한다. 막으로 둘러싸인 세포 소기관이 없다. 유전물질은 원형으로 세포질 내에 자유롭게 떠있다. 일반적으로 염색체 외에도 플라스미드라고 하는 작은 원형 DNA를 가지고 있다. 세균은 보통 원형 플라스미드를 가지나 선형 플라스미드를 가지고 있는 세균도 있다.
진핵 생물은 단세포 또는 다세포 생물로 핵막이 있으며, 세포의 크기가 10~100μm로 큰 편이다. 다양한 막성 세포 소기관이 존재하며 DNA가 들어있는 세포소기관인 세포핵이 있다. 염색체는 선형 DNA와 히스톤 단백질로 구성되어 있다. 미토콘드리아와 엽록체 같은 세포 소기관도 DNA를 갖고 있다. 세포벽은 식물과 곰팡이에만 존재한다.

2) Plasmid DNA
Plasmid DNA는 원핵 생물과 일부 진핵 생물이 가지는 염색체 DNA 외에 작은 고리형 DNA이다. 플라스미드는 세균의 생존에 필수적이지는 않다. 플라스미드는 자신의 복제기점을 소유하기 때문에 염색체와는 독립적으로 복제되어 증식할 수 있다. 세포내에 존재하는 수는 세포마다 다르며, 한 가지 이상의 유전자를 암호화하고 있는데 특정 환경에 생존하기 위해 중요한 기능을 수행하는 경우가 많다. 세균에서 분리하여 조작하기 쉽고, 세포 내로 쉽게 들어갈 수 있다. 이런 특성을 이용해 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내어 제한효소로 자르고 필요로 하는 유전자를 삽입하여, 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자 재조합 기술을 사용한다.

참고자료

· 미생물학백과, 제한효소, https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5894393&cid=61232&categoryId=61232
· 미생물학백과, 프랄스미드, https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5145033&cid=61232&categoryId=61232
· 위키백과, 플라스미드, https://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%94%8C%EB%9D%BC%EC%8A%A4%EB%AF%B8%EB%93%9C
· 위키백과, 세포, https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%84%B8%ED%8F%AC
· 한국과학, 전기영동의 원리와 실험, https://local.koreasci.com/download/manual/101_kor.pdf
· Tistory, 플라스미드 dna, https://woochan-autobiography.tistory.com/97#4.3.%20Linear%20plasmid%20DNA