분자생물학 연구방법론 필기자료

소개

연세대학교 의과학과 분자생물학 연구방법론 필기 요약집 입니다.

목차

1. DNA는 4 개의 염기로 구성
2. DNA의 구조
3. Restriction enzyme (endonuclease)
4. Restriction-Modification (R-M) system
5. Ligation
6. Joining of vector to insert
7. Transformation (형질전환)
8. Cloning Vector

본문내용

1.DNA는 4 개의 염기로 구성되어 있음
 Purine: Adenine, Guanine
 Pyrimidine: Thymine, Cytosine

3.Restriction enzyme (endonuclease)
 1960년대 후기에 Stewart Linn과 Werner Arber에 의해 발견.
 DNA의 특정 부분에 붙어 양 쪽 가닥의 backbone을 자른다. (박테리아의 phage로부터 감염에 대한 방어체계)
 Restriction endonucleases는 DNA fragment를 만들기 위한 핵심 요소이다.
 Palindromic sequence: 거울상으로 앞뒤가 동일한 sequence
 Two fold symmetry, Rotational symmetry
 Cleavage of DNA by the restriction enzyme EcoR1  Sticky ends가 생성됨
 제한효소는 각각의 효소별 특정 인식 서열을 가지고 있기 때문에 각 효소별 특정 DNA의 부위를 자른다.
 Cleavage site에 따라 제한 효소의 type이 결정된다
 Type 1: Recognition sequence로부터 1,000개 이상의 base pair를 자른다.
 Type 2: Recognition sequence의 중간 부분을 자르며 genetic engineering에 유용하다.

4.Restriction-Modification (R-M) system
 박테리아는 phage의 메틸화 되지 않은 DNA만 자르고 자신의 메틸화 된 DNA는 자르지 않음.
 박테리아 DNA의 메틸화는 modification enzyme (Methylase)에 의해 진행됨. 이는 Restriction enzyme이 인식하는 부위에 해당하는 서열을 인식해 DNA를 메틸화 시킨다. 이를 통해 박테리아는 자신의 DNA를 공격하지 않는 제한효소를 만들 수 있게 된다.

참고자료

· 없음