생명과학실험1 A+ SDS-PAGE 를 이용한 단백질의 분석 보고서

소개

"생명과학실험1 SDS-PAGE 를 이용한 단백질의 분석 보고서"에 대한 내용입니다.

목차

1. Introduction
2. Materials
3. Methods
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Introduction
Ⅰ. SDS-PAGE
SDS (sodium dodecyl sulfate) 는 protein 의 aminio acid 2개당 1개 정도와 결합해 protein 내부 non-covalent bond 를 disrupt 한다. 이를 통해 protein 을 linear 하게 변성하고, protein 이 negative charge 를 띄게 한다. SDS-PAGE 는 SDS 와 2-ME 를 통해 변성되고 환원되어 일정한 구조를 가지고, charge density 가 일정해진 단백질들이 분자량에만 의존적이게 이동하도록 하는 Gel Electrophoresis Method 이다. SDS running buffer 를 주입한 gel tank 에 protein 을 well 에 loading 하고 PAGE 를 작동시키면 – charge 를 띄는 glycine , protein , Cl- 는 + 극 방향으로 이동하는데, 전기장 속에서 molecule 의 속도는 v= Eq/f 을 따른다.

Ⅱ. Gel 에 들어가는 시료
Polyacrylamide gel 의 Acrylamide 는 polymer 을 형성하고 그 사이에 N,N'-Methylene-bis(Acrylamide) 를 cross link 시켜 gel 에 net 를 형성한다. TEMED 는 catalyst 로 쉽게 free radical 을 형성하게 해 gel 형성을 촉진한다. Ammonium persulfate 는 free radical polymerizatoin 의 initator 이다. SDS 는 주입될 protein 을 linear 하게 변성하고, negative charge 를 띄게 한다. pH가 다른 두 Tris-HCl 은 내부 물질의 mobility 를 다르게 해 discontinuous gel 을 형성한다. 각 gel 내부에선 pH 를 유지하는 역할을 한다.

참고자료

· David L. Nelson, Michael M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry 6th Edition, New York: W. H Freeman and Company, 2016, pp. 93, 94