[이화여대 생명과학실험3 분반1등 A+ 레포트] Observation of Actin Filament

소개

이화여자대학교 생명과학실험1 과목 A+ 레포트입니다.
정성 들여 작성했습니다. 참고하시어 좋은 결과 있으시길 바랍니다.

목차

I. 실험 목표

II. Introduction
1. 세포 내 Actin Filament의 기능과 배열 구조
① Structure of Actin Filament
② Arrangement of Actin Filament
③ Function of Actin Filament
2. Phalloidin의 원리와 Formaldehyde, Triton X-100, BSA의 역할
① Phalloidin
② Formaldehyde
③ Triton X-100
④ BSA

III. Materials & Method
1. 실험 도구(Materials)
2. 실험 과정(Method)

IV. Results
1. 형광 현미경으로 FITC-conjugated phalloidin을 관찰하는 원리
2. 관찰 결과

V. Discussion

VI. References

본문내용

I. 실험 목표
세포 골격 구성 요소 중 하나인 actin filament는 F-actin으로 구성되어 있다. F-actin에 specific 하게 결합하는 물질인 phalloidin과 이에 tag 된 FITC를 통해 세포 내 actin filament를 관찰하고, fluorescence microscope를 통한 관찰의 원리를 이해한다.
II. Introduction
1. 세포 내 Actin Filament의 기능과 배열 구조
Microfilament라고도 불리는 actin filament는 F-actin으로 구성된 주요 세포 골격 구성 요소로서, 세 포 골격 유지 및 신호 전달 등 다양한 기능을 담당한다.
① Structure of Actin Filament
Actin filament를 구성하는 F-actin은 monomer인 G-actin이 polymerization 하여 긴 나선형 막대 형태의 polymer가 된 것으로, ATP를 이용하여 신장한다. G-actin에는 ATP 혹은 ADP가 연결되어 있다. G-actin에 ATP가 결합한 상태일 경우, 서로 간의 친화력이 높아 actin filament의 말단에 G-actin이 붙어 F-actin의 신장이 일어난다. 이 과정은 동적 평형에 도달할 때까지 지속된다. 만약 임계 농도보다 G-actin의 농도가 낮으면, actin filament 말단의 G-actin에 결합한 ATP가 가수분해 되어 ADP가 된다. 이때의 ADP가 결합된 G-actin은 ATP에 비해 서로 간의 친화력이 낮으므로 actin filament 말단에서 떨어져 분해되며, 이 과정 또한 동적 평형에 도달할 때까지 지속된다. 이때 actin filament의 말단은 plus(+) end와 minus(-) end로 구분되는데, 신장이 일어나기 위한 임계 농 도는 plus(+) end가 더 낮으므로 minus(-) end보다 plus(+) end의 신장이 더 빠르게 이루어진다.

참고자료

· cell cortex: Svitkina TM. Actin Cell Cortex: Structure and Molecular Organization. Trends Cell Biol. 2020 Jul;30(7):556-565. doi: 10.1016/j.tcb.2020.03.005. Epub 2020 Apr 8. PMID: 32278656; PMCID: PMC7566779.
· stress fiber: Sari Tojkander, Gergana Gateva, Pekka Lappalainen; Actin stress fibers – assembly, dynamics and biological roles. J Cell Sci 15 April 2012; 125 (8): 1855–1864. doi: https://doi.org/10.1242/jcs.098087
· Lisa A. Urry, Michael L. Cain, Steven A. Wasserman, Peter V. Minrosky, Rebecca Orr, Campbell Biology, 12th edition, Pearson, 2021, pp.134-139
· Walter, Peter (University of California, San Francisco), Molecular Biology of the Cell, 7th edition, WW Norton & Co, 2022, pp. 957-1025
· 김우중(Woo Joong Kim),천진옥(Jin Ok Chun),홍은경(Eun Gyoung Hong),성현주(Hyun Joo Sung),임인기(In Kee Rim),전용철(Yong Cheol Jeon),전노원(Rho Won Chun),이명석(Myung Seok Lee), and 정규원(Kyu Won Chung). "Phalloidin 에 의해 유발된 간미세구조의 변화." 대한내과학회지 48.1 (1995): 89-98.
· 검색어 「formaldehyde」, 『Merck』, https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/product/sigma/f8775, 접속일 2024.05.30.
· 검색어 「triton x-100」, 『Merck』, https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/product/sigma/t8787?utm_source=google&utm_medium=cpc&utm_campaign=13065547411&utm_content=130760049348&gclid=CjwKCAjwx-CyBhAqEiwAeOcTdaESDKZyx8eJw1AOZHn_u6VfsgpNYSh6ZLWn9aCpgRe9_YVjyjopZBoCOm4QAvD_BwE, 접속일 2024.05.30.
· 검색어 「BSA」, 『Merck』, https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/products/cell-culture-and-analysis/cell-culture-supplements-and-reagents/albumins-and-transport-proteins/bovine-serum-albumin, 접속일 2024.05.30.