인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 9. Polyethylenimine (PEI) 나노 복합체를 이용한 세포 내 siRNA 전달 및 RNA 간섭 평가

소개

✔ 인천대학교 나노바이오실험(2) '9. Polyethylenimine (PEI) 나노 복합체를 이용한 세포 내 siRNA 전달 및 RNA 간섭 평가' 자료입니다.
✔ 레포트 마지막에 엑셀로 계산하는 과정을 캡쳐하여, 보고 따라할 수 있도록 첨부하였습니다.
✔ 나노바이오실험(2) 과목은 23년 2학기에 A+를 받았고, 해당 레포트 점수는 10점 만점에 9점 이었습니다.
✔ 표절률에 문제가 될 수 있으니 자료를 그대로 제출하지 마시고, 참고 용도로 사용하시길 바랍니다.
✔ 실험은 학기마다 약간씩 다르게 진행하기 때문에, 실험 수업에서 알려준 작성 필수 요소에 맞추어 작성하시고, 부가적으로 참고하시는 것을 추천드립니다. 제 답안 또한 오류가 있을 수 있고, 수업마다 채점 기준 또한 다르니 순수 정답 보다는 과정을 위주로 확인하시면 충분히 도움 될 것 같습니다.

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Materials & Methods

4. Results

5. Discussions

6. References

+엑셀 계산 과정

본문내용

Ⅰ. Abstract
이번 실험에서는 양이온성 branched polyethylenimine (B-PEI)를 이용해 siRNA/PEI 나노입자를 만들고, GFP-silencing siRNA를 암세포 내로 전달한다. 이를 통해 RNA interference (RNAi) 간섭 효율을 세포 내 GFP 발현량의 감소로 확인한다. 이 때 나노복합체의 N/P ratio에 따른 RNA 간섭 효율에 대해서도 살펴본다. 실험 결과는 두 가지 측정을 이용하여 분석하였다. 먼저 형광현미경으로 얻은 형광이미지를 분석했을 때, Control과 Free siRNA sample에서는 형광이 비슷한 정도로 관찰되었고 N/P ratio=5에 비해 N/P ratio=20의 형광이 적게 보였다. 이를 통해 RNA 간섭 효율은 N/P ratio가 높아짐에 따라 증가했으며, GFP 발현이 감소했다는 것 알 수 있었다. 다음으로 flow cytometer로 측정하여 도출한 N/P ratio에 따른 GFP 발현량(%)은 control, free siRNA, N/P=5, N/P=20에서 각각 100%, 102.5%, 114.3%, 57.8%였다. GFP 발현량은 N/P=5, free siRNA, control, N/P=20 순으로 감소했다. 이를 통해, GFP 발현량은 N/P ratio=5일 때보다 N/P ratio=20일 때 확연하게 감소하는 것을 알 수 있었다.

Ⅱ. Introduction
- 실험 목표 : 양이온성 branched polyethylenimine (B-PEI)를 이용해 GFP-silencing siRNA를 암세포 내로 전달하고 RNA interference (RNAi) 간섭 효율을 세포 내 GFP 발현량의 감소를 통해 확인한다. 이 때 나노복합체의 N/P ratio에 따른 RNA 간섭 효율에 대해서도 살펴본다.
1. N/P ratio에 따른 Branched PEI의 RNA 간섭 효율 변화

참고자료

· Harris 분석화학, 제 10판, 자유아카데미, Daniel C. Harris
· 생명과학대사전, 2008, 아카데미서적
· RNA 간섭현상 : https://www.umassmed.edu/rti/biology/rna/how-rnai-works/
· Pharmacokinetic Modulation with Particulate Drug Formulations, 2006
· Nanocarrier Technologies; 2006, p113-138, 26p