Virus RNA 추출 및 PCR 결과레포트

소개

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목차

1. 실험 목적 및 개요
2. 실험 방법
3. 실험 결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적 및 개요
바이러스는 자연 환경에 널리 분포하지만 매우 작고 살아있는 숙주 내에서만 증식하기 때문에 그 검출이 쉽지 않다. 따라서 바이러스의 존재 유/무와 동정을 위하여 세포감염을 통해 얻은 바이러스를 분자생물학적 방법 (PCR)을 사용하여 확인하는 것에 목적이 있다.

2. 실험 방법
A. Sample setting
1) Hela cell을 6 well plate에 seeding: 1.5x10^6/well (2ml), 24h incubation, 37’C
2) HRV1B infection: 24h incubation, 33’C (HRV1B의 활성 온도)
3) Plate 통째로 -80’C에 넣고 녹이기를 2~3회 반복 (cell을 모두 깨서 RNA를 얻기 위함)
4) 완성된 sample 200ul로 RNA isolation kit를 이용해 RNA를 얻어냄

B. RNA isolation
1) Sample 200ul 준비
2) VB lysis buffer 400ul 첨가(세포 용해)
3) Vortexing, 10min, room temp.

참고자료

· 한국분자세포생물학회:Taqpolymerase/2022.10.05/ https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5569069&cid=61233&categoryId=61233
· 두산백과 두피디아:Reverse transcriptase/2022.10.05/ https://terms.naver.com/entry.naver?docId=1126303&cid=40942&categoryId=32315