[10점/A+] 연세대학교 공학생물학 및 실험I 3주차 단백질의 정량

소개

"[10점/A+] 연세대학교 공학생물학 및 실험I 3주차 단백질의 정량"에 대한 내용입니다.

목차

I. 이론적 배경
1. 단백질
2. Bradford 단백질 정량법 (Bradford Protein Assay)

II. 실험 목적

III. 실험 준비물

IV. 실험 방법

V. 실험 결과

VI. Discussion

VII. Further Study
1. BSA 이외의 Bradford assay에 사용될 수 있는 기준 단백질은 어떠한 것들이 있는가? 이러한 기준 단백질의 공통적인 특징은 무엇인가?
2. Bradford assay 외에 시료내 단백질의 양을 재는 방법은 무엇이 있는가? 어떠한 생화학적 반응에 의해 이들 assay가 진행되는가?

본문내용

1. 단백질
단백질은 생체 내 거대 분자들 중 하나로, 거의 모든 생명체의 역동적인 기능은 단백질에 의존한다. 단백질은 대부분의 세포에서 건조 질량의 50% 이상을 차지하는 만큼 다양한 기능을 수행한다. 대표적인 기능을 가진 단백질들은 효소 단백질, 방어 단백질, 저장 단백질, 수송 단백질, 호르몬 단백질, 수용체 단백질, 수축 및 운동 단백질, 구조 단백질이 있다.

1) 단위체
모든 단백질은 20개의 아미노산으로부터 조합되어 만들어지는 중합체이다. 아미노산의 중합체를 폴리펩타이드(polypeptide)라 부르고, 단백질(protein)은 각기 접히거나 꼬여 특이한 3차원적 구조를 가지는 하나 또는 그 이상의 폴리펩타이드로 이루어져 생물학적 기능을 갖는 분자이다.
모든 아미노산(amino acid)은 공통적인 구조를 가지게 되는데, 이는 카르복실기, 아미노기, 곁사슬, 수소, 알파 탄소로 이루어져 있다.

2. Bradford 단백질 정량법 (Bradford Protein Assay)
Bradford 단백질 정량법은 분광광도계를 이용하여 용액 속에 함유되어 있는 단백질의 양을 분석하는 방법이다.
1) 원리
이 정량법의 원리는 쿠마시블루 G-250 (Coomassie Blue G-250) 염색약을 이용하여 용액 별 흡광도 차이를 이용하는 것이다. 기존의 붉은 색이었던 Coomassie Blue 염색약은 산성 조건에서 푸른 색으로 바뀌며 단백질과 결합하게 된다. 이때 Coomassie Blue – Protein complex가 형성되는 과정에서 붉은 색을 띠는 Coomassie Blue가 단백질에게 전자를 제공하며 단백질의 소수성 부위가 외부로 노출된다. Coomassie Blue G-250 염색약과 단백질의 소수성 부위는 반데르발스 힘으로 비공유 결합을 이룬다. 또한, 단백질의 양전하를 띠는 아민기와 Coomassie Blue G-250의 음전하를 띠는 부위가 이온 결합을 하게 되며..

<중 략>

참고자료

· 대표역자 전상학. 2016. Campbell Biology 10th Edition. 바이오사이언스출판
· 대표역자 정종우. 2018. 생명:생물의 과학. 라이프사이언스
· BCA assay; https://www.takara.co.kr/web01/product/productList.asp?LCode=T9300A
· Gammaglobulin; http://amc.seoul.kr/asan/healthinfo/easymediterm/easyMediTermDetail.do?dictId=112