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[서강대학교 현대생물학실험2] (1차 풀레포트) Competent Cell, PCR, gel electrophoresis2025.01.221. 배지 세포를 배양하기 위해 영양분을 함유한 물질을 배지라고 한다. Sterilization은 무균 상태의 배지를 조제할 때 필요한 과정으로, heat, chemical, radiation 등의 방법으로 멸균 처리할 수 있다. 2. Competent cell Competent cell은 외부 유전물질을 수용하여 세포의 형질을 전환시킬 수 있는 세포이다. 본실험은 LB(Luria-Bertani) 배지를 액체와 고체 상태로 조제하여 고온, 고압의 수증기로 멸균하였고, 조제한 배지에 항생제 내성 유전자를 가진 plasmid를 삽입한 ...2025.01.22
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[A+ 리포트] Gel Extraction / Digestion & Purification (분자생물학실험)2025.04.251. Gel Extraction 겔 전기영동 과정으로부터 얻은 DNA 조각을 순수한 형태로 정제할 수 있다. 겔 추출로 얻은 순수한 DNA 조각을 제한효소를 이용하여 특정 부위를 잘라낼 수 있다. 2. Digestion 제한효소를 이용하여 Gel Extraction 산물로 얻은 DNA 조각을 특정 부위에서 절단할 수 있다. 제한효소 처리 시 주의사항으로는 제한효소 용액의 표면에서 취하고 강한 충격을 피하는 것이다. 3. Purification Digestion이 완료된 DNA 조각을 PB buffer, PE buffer 등을 이용하...2025.04.25
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[일반생물학실험]DNA 추출2025.01.151. DNA 추출 이 실험에서는 플라스미드라는 유전체 이외의 자가복제 DNA를 분리하여 DNA 추출 및 정제 방법의 원리를 배우고, DNA의 이화학적 특성을 이해하는 것이 목적입니다. DNA의 발견, 구조, 분자 구조, 플라스미드, 유전자 검사와 문제점, 젤 전기 영동 등 DNA와 관련된 다양한 내용이 다루어졌습니다. 2. DNA 구조 DNA는 염기, 당, 인산이 결합된 뉴클레오티드로 구성되며, 이중 나선 구조를 가집니다. 염기는 퓨린과 피리미딘 계열로 나뉘며, 아데닌-티민, 구아닌-시토신이 수소결합으로 결합합니다. DNA는 이러한...2025.01.15
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미세조류의 DNA 추출2025.01.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 시험관 내에서 DNA 분자의 특정 염기 서열을 선택적으로 빠르게 증폭하는 기술로, DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. PCR은 유전자 연구, 질병 진단 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. DNA 추출 DNA 추출은 생물로부터 전체 유전체 DNA를 추출하는 과정으로, 이번 실험에서는 spin column 방식을 사용하였습니다. 세포 용해, DNA 결합, 세척, 용출의 단계를 거쳐 DNA를 추출하였습니다. 3. 전기영동 전기영동은 DNA 분자를 크기에 따...2025.01.13
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박테리아에서 DNA 분리 (생화학 실험)2025.01.161. Alkaline lysis mini prep Alkaline lysis mini prep은 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법이다. 이 방법은 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해낸 후, 크로모좀 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 순수한 플라스미드 DNA만을 회수하는 것이 핵심이다. 알칼리 조건에서 크로모좀 DNA는 변성되어 침전되지만, 플라스미드 DNA는 supercoiled 상태를 유지하여 회수할 수 있다. 2. 플라스미드 DNA 분리 과정 플라스미드 DNA 분리 과정은 크게 3단계로 이...2025.01.16
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Agarose gel electrophoresis2025.05.141. Gel electrophoresis의 원리 Gel electrophoresis는 전기 영동으로, 단백질, 핵산과 같이 전하를 가진 물질이 전기장 존재 환경에서 반대쪽 극을 향해 움직이는 성질을 이용해서 물질을 분리한다. 분자의 이동속도에 영향을 주는 요인은 입자 요인(전하량, 크기, 모양)과 환경 요인(pH, 점성도, 이온 농도, 이온 세기, gel 종류)이 있다. 전기 이동도(μ)를 통해 입자의 이동속도를 이해할 수 있으며, gel의 농도가 높아질수록 미세한 구멍의 크기가 작아져 분자의 이동 속도가 느려진다. 2. Agaro...2025.05.14
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Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis 레포트2025.05.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합 효소 연쇄반응이라 불린다. 캐리 멀리스에 의하여 1985년에 개발된 중합 효소 연쇄반응(PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법이다. PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제 및 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같이 매우 복잡하고 양이 적은 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. Tm은 프라이머 용융 온도라고 한다. 모든 프라이머는 거의 동일한 온도...2025.05.04
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PCR에 관한 보고서2025.01.151. PCR의 발견과 역사 1983년 Kary Mullis에 의해 개발된 PCR은 특정 DNA 서열을 짧은 시간 안에 대량으로 증폭할 수 있는 혁신적인 기술이다. PCR은 생명과학, 의학, 법의학, 환경과학 등 다양한 분야에서 중요한 역할을 하고 있으며, DNA 분석의 표준 방법으로 자리 잡았다. PCR의 도입은 유전자 연구와 응용에 있어서 획기적인 변화를 가져왔고, 현대 생물학의 발전에 크게 기여하였다. 2. PCR의 원리 PCR의 기본 원리는 DNA 복제 과정을 모방하는 것이다. 이 과정은 DNA 이중 나선의 변성, 프라이머 결...2025.01.15
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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유전학2_경북대2025.05.031. DNA microarray DNA microarray는 고체 표면에 부착된 미세한 DNA 조각의 집합체입니다. DNA 칩과의 차이점은 DNA 칩은 합성된 올리고뉴클레오타이드로 배열되어 있고, DNA 마이크로어레이는 변성된 DNA가 배열되어 있습니다. DNA 마이크로어레이의 장점은 매우 희귀한 전사체도 검출할 수 있고 전사체 수준의 작은 차이도 감지할 수 있습니다. 단점은 프로브의 하이브리드화 효율이 다를 수 있고 사전 서열 지식이 필요하다는 것입니다. 2. RNA-seq RNA-seq은 각 전사체를 서열에 따라 식별할 수 있고...2025.05.03