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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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전기영동2025.01.161. 전기영동의 원리 전기영동은 전하를 띤 분자가 전기장 안에서 (+)극이나 (-)극으로 이동하는 현상을 이용한 기술이다. 전하를 띤 분자는 자신의 전하와 반대 극으로 이동하게 되므로, 혼합된 분자를 전류가 흐르는 매질에 두면, 각 분자는 자신의 전하에 따라 양극 또는 음극으로 이동하게 된다. 이를 이용하여 혼합된 분자를 분리할 수 있다. 2. 전기영동액과 전기분해작용 전기영동을 수행하려면 전류가 흐를 수 있는 전도성 물질로 양극이 연결되어야 한다. 전도성 물질은 주로 이온결합화합물인 염이 들어있는 수용액이 사용된다. 전기영동 시 ...2025.01.16
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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DNA 추출2025.04.281. DNA 구조 DNA는 Deoxyribonucleic Acid의 약자로 nucleotide의 중합체인 두개의 긴 가닥이 서로 꼬여 이중나선 구조를 이루고 있는 고분자 화합물이다. DNA의 구조를 살펴보면 한 분자당 polynucleotide 사슬 2개로 구성되어 있으며, 각 가닥은 네가지 종류의 nucleotide로 구성되어 있고, 이 두 가닥은 nucleotide의 염기부위 간 수소결합을 통해 결합한다. 2. DNA 추출 과정 바나나를 소금, 물과 함께 믹서기로 갈아서 걸러주어 세포벽을 파괴하고 DNA가 중성을 띠게 만들어주어...2025.04.28
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[A+레포트] DNA 제한효소 예비레포트2025.01.221. 제한효소 제한효소는 생물이 자기 세포에 다른 종류의 DNA가 들어오면 이를 파괴하는 기능을 가진 효소이다. 유전공학에서는 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소로 알려져 있다. 제한효소에는 크게 3종류가 있으며, 모두 특정한 DNA 염기 배열을 인식한다. 유전공학에서 잘 사용되는 것은 II형 제한효소이며, 절단부위가 인식부위의 가운데 위치하는 것이 특징이다. 2. 아가로스 겔 전기영동 전기영동은 DNA와 같은 전하를 띠는 물질들을 전기적으로 일정한 방향으로 이동시켜 분리하는 기술이다. DNA는 인산기에서 H+를 방출...2025.01.22
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일반생물학실험 결과레포트 [실험8] 대장균에서 플라스미드 DNA 소량 분리2025.05.131. S1, S2, S3 buffer 성분 및 역할 S1 buffer(재부유, Resuspension buffer)에는 EDTA, RNase, glucose, Tris-Cl이 포함되어 있으며, 이들은 세포벽 파괴, RNA 분해 촉진, 삼투압 유지, pH 유지 등의 역할을 한다. S2 buffer(용해, Lysis buffer)에는 도데실황산나트륨(SDS)과 수산화 나트륨이 포함되어 있으며, 이들은 세포막 분해, DNA와 RNA 변성, 단백질 제거 등의 역할을 한다. S3 buffer(중화, Neutralization buffer)에...2025.05.13
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아주대 생물학실험1 결과보고서 [14주차 Plasmid DNA 추출]2025.01.031. 원핵세포와 진핵세포의 유전자 위치 및 특징 차이 원핵세포의 경우 유전체가 한 분자의 원형 DNA로 구성되며, 세포질에 위치한다. 반면 진핵세포의 경우 선형 구조의 DNA가 히스톤 단백질과 결합해 염색체를 구성하고 핵 안에 위치한다. 원핵세포에는 막으로 둘러싸인 세포 소기관이 없으며 세포질에 원형의 작은 DNA인 플라스미드를 갖기도 한다. 진핵세포는 복잡한 막 구조의 세포 소기관을 가지며 플라스미드를 거의 갖지 않는다. 2. 플라스미드 DNA의 물리적 형태 플라스미드 DNA는 Supercoiled DNA, Open-circula...2025.01.03
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분자생물학 및 유전공학의 실험방법2025.05.101. Restriction endonuclease DNA의 specific short sequences를 인식하고 쪼갤 수 있는 enzyme입니다. Cloning vectors는 host cell에 외래 DNA를 삽입하기 위해 사용할 수 있는 DNA로, selectable markers와 replication origins을 가지고 있습니다. 2. Nucleases Nucleases(핵산가수분해효소)는 phospho diester bond의 ester bond를 Hydrolyze하는 enzyme이며, Phosphatases(인산분해...2025.05.10
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[A+ 리포트] Ligation & Transformation (분자생물학실험)2025.04.251. Ligation 실험에서는 Vector와 PCR 산물을 Ligation하는 과정을 수행하였습니다. Ligation 시 주의사항으로는 T4 Ligase를 ice에 보관하며 가장 마지막에 첨가하고, 강한 충격을 피하는 것 등이 있습니다. 2. Transformation Transformation 과정에서는 Competent cell(E.coli)에 Ligation 산물을 처리하고 Heat-shock을 주었습니다. Competent cell은 온도에 매우 민감하므로 실험 중 ice 상태를 유지하는 것이 중요합니다. 실험 결과 일부 ...2025.04.25
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연세대(미래) 13주차. DNA분리2025.05.031. DNA 구조 DNA는 인산기, deoxyribose, 4종류의 질소염기로 구성되며, 두 개의 DNA 가닥이 서로 마주보고 있는 상태에서 당-인산-당 골격이 바깥쪽에 위치하고, 두 사슬의 염기들이 수소결합에 의해 쌍을 이루고 있다. A는 항상 T와, G는 항상 C와 쌍을 이루는 상보적인 염기쌍 구조를 가진다. 2. 중심원리 중심원리에 따르면, DNA를 주형으로 하여 RNA를 복사해내는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 세포질에서 번역되어 단백질로 전환되는 번역 과정이 있다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. ...2025.05.03
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