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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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[유전학] DNA sequencing, vector의 제작, NGS2025.05.031. DNA sequencing DNA는 단백질을 암호화 하고있는 물질로 A,T,G,C라는 기본 단위로 이루어진다. 어떤 서열을 갖고 있는 지에 따라 결과적으로 생산되는 단백질이 달라지게 되는데 이 서열을 확인하는 것은 분자생물학에 있어서 큰 의미가 있다. DNA sequencing은 그 DNA 서열을 확인하는 방법이다. 과거에는 그 방법으로 sanger method를 사용했지만 현재는 더욱 빠르고 신속하게 원하는 DNA서열을 확인할 수 있는 방법인 NGS를 통해 염기서열을 확인한다. 2. Vector 제작 우리는 DNA 재조합 기...2025.05.03
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[유전학] transfection method와 T7E12025.05.031. Transfection 방법 Transfection은 세포 내로 외부의 DNA나 RNA가 인위적으로 전달되는 과정을 의미한다. 핵산이 세포 내부로 들어가려면 세포막을 통과해야 하는데 이 방법에는 화학적, 생물학적, 물리학적 방법들이 이용된다. 대표적인 물리학적 방법으로는 Electroporation과 biolistics(유전자 총)이 있으며, 화학적 방법으로는 cationic lipid transfection이 있다. 각각의 방법들은 장단점이 있어 실험 목적과 이용하는 세포에 따라 선택하게 된다. 2. 새로운 Transfect...2025.05.03
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제하기 - 분자생물학 실험 예비보고서2025.01.041. 플라스미드 정제 이 실험에서는 박테리아 세포로부터 플라스미드를 정제하는 과정이 설명되어 있습니다. 플라스미드는 박테리아 세포 내에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 조작 실험에 많이 사용됩니다. 이 실험에서는 플라스미드를 추출하고 정제하는 단계별 과정이 자세히 기술되어 있습니다. 2. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 진행된 것으로, 유전자 조작 및 분석을 위한 기본적인 실험 기법들이 소개되어 있습니다. 플라스미드 정제 외에도 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 분자생물학 실험 기법들이 포함되어 있...2025.01.04
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전기영동 예비보고서2025.01.121. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나입니다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 합니다. 전기영동의 종류에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동이 있습니다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 Gel의 농도, DNA 분자의 크기, 전압, DNA의 형태 등이 있습니다. TAE buffer는 Tris, Acetate, EDTA로 구성되어 있으며 DNA를 끌어주는 역할을 ...2025.01.12
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단백질 검정 결과2025.01.221. 단백질 검정 실험 단백질 검정 실험을 수행하여 다양한 용액들의 반응을 관찰하였다. 1% 글리신 용액은 가열 전후 색이 확연히 달라졌으나, 펩톤, 1% 설탕 용액, 1% 녹말 용액, 우유, 증류수 등은 반응이 진행되지 않았다. 실험 결과를 뒷받침하는 이론적 배경을 제시하였으며, 실험 과정에서 발생할 수 있는 오차 요인들을 분석하였다. 2. 닌히드린 반응 닌히드린 반응은 온도와 pH에 민감하므로, 정확한 실험 결과를 얻기 위해서는 이를 고려해야 한다. 또한 반응 시간, 시약의 농도 등도 실험 결과에 영향을 미치는 요인이다. 습도에...2025.01.22
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PCR 기술을 이용한 PCR product 전기영동 확인2025.01.031. PCR 기술 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 복제를 위한 기술로, DNA 주형, 프라이머, DNA 뉴클레오타이드, Taq DNA 중합효소, DNA 중합효소 완충용액 등을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 이 실험에서는 PCR을 통해 유전자를 확보하고, 전기영동을 통해 증폭된 DNA를 확인하며, PCR 뉴클레오타이드를 정제하는 과정을 수행한다. 2. 전기영동 전기영동은 아가로스 겔과 같은 고분자 물질로 된 겔을 이용하여 핵산이나 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산은 음전하를 띠므로 양극 쪽으로 이동하며...2025.01.03
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미세조류의 DNA 추출2025.01.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 시험관 내에서 DNA 분자의 특정 염기 서열을 선택적으로 빠르게 증폭하는 기술로, DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. PCR은 유전자 연구, 질병 진단 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. DNA 추출 DNA 추출은 생물로부터 전체 유전체 DNA를 추출하는 과정으로, 이번 실험에서는 spin column 방식을 사용하였습니다. 세포 용해, DNA 결합, 세척, 용출의 단계를 거쳐 DNA를 추출하였습니다. 3. 전기영동 전기영동은 DNA 분자를 크기에 따...2025.01.13
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재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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