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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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2022년 1학기 서울대 생물학실험 모듈 3 실험보고서2025.01.231. 형질전환 본 실험에서는 재조합된 플라스미드로 대장균을 형질전환하고, PCR과 전기 영동을 통해 형질전환의 결과를 DNA 수준에서 확인하고자 하였다. 여러 종의 플라스미드를 대장균에 도입해 형질전환을 유도했으며, colony PCR을 통해 도입된 플라스미드를 대량으로 복제한 후 확인했다. 2. PCR PCR은 DNA 중합 효소와 프라이머를 이용해 DNA의 특정 부분을 대량으로, 인공 환경에서 복제하는 기술이다. PCR을 통해 실험에서 활용되는 DNA를 대량으로 복제해 사용할 수 있으므로 PCR 기술은 유전 공학에서 매우 중요하다...2025.01.23
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
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바이오 의약품의 작용기작에 대하여2025.01.181. 패혈증 치료제 단디바이오는 패혈증 치료제를 연구하고 있다. 패혈증은 세균, 바이러스 등이 몸 속에 침투하여 피를 타고 돌며 만든 독성물질로 온몸이 중독 되어 사망에 이르는 병이다. 그람 음성균에서 분비, 사멸된 후 유출되는 내독소인 LPS (lipopolysaccharide)에 의해 사이토카인 폭풍이 일어나 과도한 염증반응에 의해 장기 손상을 유발하여 사망에 이르게 한다. 기존 항생제는 항생제 내성 발생이나 싸이토카인 폭풍, 장기부전 유발과 같은 부작용과 내독소를 중화할 수 없다는 단점이 있다. 단디바이오는 내독소에 특이적으로...2025.01.18
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원핵세포와 진핵세포의 차이점2025.01.061. 원핵세포 원핵세포는 단세포 생물로 약 35억년 전 지구상에 출현한 최초의 세포입니다. 원핵세포는 세포막, 세포질, 리보솜, DNA로 구성되어 있으며, 당질피질, 세포벽, 섬모, 편모, 플라스미드, 봉입, 내생포자와 같은 부속구조를 가지고 있습니다. 원핵세포는 DNA가 세포질 내 뉴클레오이드에 있고 히스톤 단백질과 결합되어 있지 않으며, 구획화가 되어 있지 않아 무작위적인 분자운동을 합니다. 원핵세포는 세포분열 시 이분법이나 단순분열을 하며, 리보솜이 진핵세포보다 약간 작고 다른 RNA와 단백질로 구성되어 있습니다. 2. 진핵세...2025.01.06
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제한효소와 아가로즈젤 전기영동/ Restriction Digest and Agarose Gel Electrophoresis2025.01.121. Plasmid DNA Plasmid DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 vector를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 cell에는 plasmid DNA와 대장균 cell의 염색체 DNA인 chromosomal DNA가 독자적으로 존재하기 때문에 plasmid DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 일반적으로 Restriction enzymes를 처리하지 않은 plasmid DNA의 경우 ope...2025.01.12
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Lewin's Essential GENES 분자생물학 4판 정리노트 03. 분단된 유전자2025.05.101. Exon과 Intron Exon은 단백질 암호화 부위(coding region)이며, Intron은 noncoding region으로 RNA splicing 과정에서 제거됩니다. Exon의 순서는 DNA와 RNA 모두 동일합니다. 2. 분단된 유전자의 구조 분단된 유전자는 Exon과 Intron으로 구성되어 있습니다. Intron은 mRNA와 hybridization되지 않고 loop가 형성됩니다. 단백질 서열의 변화에 직접적으로 영향을 미치는 돌연변이는 Exon에서 일어납니다. 3. Exon과 Intron의 진화 Exon 서...2025.05.10
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DNA 구조의 이해 & DNA 추출2025.05.111. DNA 구조 DNA는 디옥시리보뉴클레오티드로 이루어진 고분자 중합체로, 단일가닥 또는 이중가닥 형태로 존재할 수 있다. 세포를 가진 생물의 DNA는 모두 이중가닥 형태를 가진다. DNA 염기의 구조와 왓슨-클릭 염기쌍의 수소결합 패턴을 이해할 수 있다. 2. 플라스미드 플라스미드는 원핵생물의 염색체 DNA 이외의 자가복제능력을 가지는 DNA환상 분자로, 숙주인 세균에 유전적 다양성을 증가시킬 수 있다. R인자라 불리는 플라스미드는 숙주세포가 항생물질과 독성물질에 저항성을 갖도록 한다. 3. 콜리신 많은 세균균주는 플라스미드에 ...2025.05.11
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Proteomics 중간 레포트입니다.2025.05.081. Human Epidermal growth factor (hEGF) Recombinant protein hEGF는 53개의 아미노산 펩티드로 구성된 단백질로, 세 개의 이황화 결합을 가지고 있습니다. hEGF는 EGFR 수용체에 결합하여 세포 증식, 분화, 이동과 관련된 주요 유전자의 활성화를 포함한 세포 내 신호 전달 경로를 개시합니다. 내인성 농도의 hEGF 생산이 매우 낮기 때문에(50ng/mL), 재조합 DNA 기술을 기반으로 대량의 hEGF를 생산하여 효율성과 생산성을 높이고 있습니다. hEGF 재조합 단백질 생산은 D...2025.05.08
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