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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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HEK293T 세포 계대배양 및 핵산 추출 실험2025.11.171. HEK293T 세포 계대배양 HEK293T 세포는 SV40 T 항원을 발현하는 형질전환 세포로, 높은 단백질 발현을 유도한다. 계대배양은 trypsin-EDTA를 이용하여 세포를 배양용기에서 분리하고, centrifuge로 세포를 수집한 후 새로운 배지에 옮기는 과정이다. 세포는 부착단백질과 결합할 때 길게 늘어난 형태를 보이다가, trypsin 처리 후 구형으로 변한다. 8일간의 배양 관찰 결과 시간이 지날수록 배지에 세포가 증식하여 빈 공간이 감소하는 것을 확인할 수 있다. 2. Genomic DNA 추출 Genomic D...2025.11.17
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단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
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인천대학교 나노바이오실험(1) Genomic DNA prep & Gel Electrophoresis2025.01.141. Genomic DNA Genomic DNA는 염색체 DNA로, Plasmid DNA와 같은 Extra-chromosomal DNA와 대조되는 개념이다. 대부분의 생물은 모든 세포에서 같은 Genomic DNA를 갖지만, 특정 gene의 발현으로 cell type과 function이 달라진다. 어떤 organism의 genomic DNA인지에 따라 바이러스, 박테리아, 진핵생물 등의 특성을 지닌다. 2. DNA 추출 방법 DNA 추출은 Lysis, Precipitation, Purification 3단계로 이루어진다. Lysis...2025.01.14
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RNA 추출, cDNA 합성 및 qRT-PCR2025.01.181. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA의 상보적 가닥에 결합하는 2개의 프라이머를 동시에 사용하여 증폭을 원하는 DNA의 특정 영역만을 in vitro에서 복제, 증폭하는 기술이다. 3단계를 거쳐 DNA를 복제하는데, 변성, 결합, 신장 과정을 반복하여 DNA를 증폭시킨다. 2. RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR) RT-PCR은 유전자에서 만들어진 RNA에서 역전사효소를 이용하여 cDNA를 생성한 후, cDNA를 주형 가닥으로 PCR을 수행하여, 유전자의 RNA 발현...2025.01.18
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유기소재실험1_점도 및 분자량2025.05.141. 겔투과크로마토그래피법(Gel Permeation Chromatography; GPC) 겔투과크로마토그래피법(GPC)은 고속액체크로마토그라피(HPLC)의 분리양식의 일종으로, 소량의 시료(수 ㎎)로도 간편하게 평균분자량(Mn, Mw, Mz)과 분자량분포를 측정할 수 있다. GPC는 컬럼 내에서 용질의 분자 크기에 따라 분리하며, 이미 분자량을 알고 있는 표준시료를 사용하여 작성된 보정곡선으로부터 분자량을 계산한다. GPC의 한계점으로는 표준시료와의 환산치이므로 실제분자량 측정의 어려움, 분자량 분포가 실제보다 넓다는 점, 흡착성...2025.05.14
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일반생물학실험 <동물세포 및 식물세포의 관찰> 예비레포트2025.01.271. 세포의 구성 세포의 가운데에는 구형의 핵, 주위의 세포질, 세포질을 싸고 있는 세포막으로 구성된다. 식물세포는 섬유소가 주성분인 두꺼운 세포벽을 세포막 바깥에 가지고 있지만, 동물세포는 세포벽을 가지지 않는다. 동물세포와 식물세포는 세포질에 위치한 세포소기관(organelles)에도 차이가 있는데, 식물세포는 물질의 저장소 역할을 하는 액포와 광합성에 필요한 엽록체가 발달되어 있지만 동물세포에는 액포와 엽록체를 가지지 않는다. 2. 고정(fixation)과 염색(staining) 광학현미경으로 동·식물세포를 관찰할 때는 관찰이...2025.01.27
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[생물학] 생명체를 구성하는 7가지 물질의 특성2025.05.131. 물 물은 큰 응집력과 부착력 및 표면장력을 가지고 있으며 온도변화에 저항력이 강하다. 또한 용해성이 큰 만능 용매이며 완충작용에 의한 생물체의 PH 조절에 기여한다. 수소 이온과 수산화 이온으로 분리되는 것을 물의 이온화라고 하며 이는 생명체 내 화학반응에 중요한 역할을 한다. 인체 내에서 물은 세포의 형태를 유지하고 대사 작용을 높이며 혈액과 조직액의 순환을 원활하게 하고 영양소를 용해시키며, 이를 흡수, 운반한다. 또한 체내에서 불필요한 노폐물을 체외로 배설하며 혈액을 중성 내지 약알칼리성으로 유지한다. 또한 체내의 열을 ...2025.05.13
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[일반생물학실험] 전기 영동2025.01.021. 전기 영동 전기 영동은 단백질, 아미노산, 뉴클레오티드 등의 하전된 물질을 분리하거나 분석하는 데 효과적인 방법입니다. 단백질 분자는 표면에 양전하 또는 음전하를 띠고 있어, 전극을 설치하고 전압을 가하면 양극 또는 음극으로 이동하게 됩니다. 이동 속도는 입자의 전하량, 크기, 모양, 용액의 pH와 점성도, 다른 전해질의 농도 등 여러 요인에 따라 달라집니다. 전기영동법에는 이동계면 전기영동법, 띠 전기영동법, 불연속 gel 전기영동법, SDS-PAGE, agarose gel 전기영동법 등이 있습니다. 2. DNA 전기영동 D...2025.01.02
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