총 510개
-
닭 배아 단백질 전기영동 결과보고서2025.04.261. 전기영동 전기 영동은 시료 속 단백질 아미노산의 R group이 특유의 전하를 모두 음극 처리하여 단백질의 질량에 따라 ladder가 나타나도록 하는 방법입니다. 이때 단백질과 결합력이 좋은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate buffer를 이용하면 단백질의 구조를 풀어 선형으로 만들고, 구조가 풀린 단백질에 달라 붙어 음극을 띠도록 만들 수 있습니다. 이러한 방법으로 단백질이 분자량에 따라 이동하도록 만들 수 있습니다. 2. RIPA buffer RIPA buffer는 pH를 유지하는 완충용액 역할을 하며,...2025.04.26
-
대장균에서 재조합 단백질 생산 및 정제2025.01.131. 재조합 단백질 생산 대장균 BL21(DE3) 균주는 재조합 단백질 고발현에 널리 사용되며, lac 프로모터와 T7 프로모터를 이용하여 IPTG 유도 하에 단백질을 발현할 수 있다. 본 실험에서는 pET28a 벡터를 사용하여 His-tag 융합 단백질을 생산하고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피와 FPLC를 통해 단백질을 정제하는 방법을 익혔다. 2. 단백질 분석 SDS-PAGE를 통해 단백질 크기별 분리와 정제 과정을 확인하였고, Bradford assay로 단백질 농도를 정량하였다. 또한 DES와 OASS 효소 활성 측정을...2025.01.13
-
미생물의 생화학적 특성 확인(탄수화물, 단백질, 지질의 이용능 확인)2025.01.211. 유산균의 생균수 측정 시판 요구르트에서 유산균의 생균수를 측정하고, 생균수 측정법을 습득하였다. 요구르트 시료 150mL당 약 3.15 x 10^9 CFU/mL의 미생물이 존재하는 것으로 추정되었다. 실험 과정에서 오염이 발생하여 결과의 정확성이 다소 떨어지는 것으로 나타났다. 2. 미생물의 탄수화물 이용능 확인 Starch agar 배지를 이용하여 미생물의 전분 분해능을 확인하였다. Bacillus 균주는 전분을 분해하여 요오드 용액과 반응하지 않았지만, 다른 균주들은 전분 분해가 일어나지 않아 요오드 용액과 반응하여 암청색...2025.01.21
-
Peptide 질량분석2025.01.231. 펩타이드 질량분석 단백질은 20종류의 아미노산들이 여러 개 연결된 폴리펩타이드 사슬이며, 펩타이드는 둘 이상의 아미노산이 탈수축합반응을 통해 결합된 것이다. MALDI-TOF 질량분석법은 분석 물질에 자외선을 흡수하는 matrix를 넣고 레이저로 기화시켜 기체상 이온을 만들어 질량/전하수 값을 측정하는 방법이다. 실험에서는 단백질을 트립신으로 가수분해한 펩타이드 용액을 CHCA matrix와 혼합하여 MALDI-TOF 질량분석을 수행하였고, 얻어진 펩타이드 질량지문으로부터 주어진 단백질을 동정하였다. 2. MALDI-TOF 질...2025.01.23
-
[약학실습 A+] 단백질 분리 정제 결과레포트2025.01.181. 단백질 분리 정제 본 실험에서는 Size Exclusion Chromatography 기법을 이용하여 BSA와 Lysozyme으로 구성된 단백질 혼합 샘플을 분리 정제하였다. FPLC 장비를 사용하여 분리된 단백질 분획을 수집하고, UV spectroscopy를 통해 각 분획의 농도를 측정하여 수득률을 계산하였다. 실험 결과, BSA의 수득률은 24%, Lysozyme의 수득률은 16.16%로 나타났다. 이는 일반적으로 기대되는 90% 이상의 수득률에 크게 미치지 못하는 수준으로, 시간이 지나면서 단백질 구조가 분해되었기 때문...2025.01.18
-
Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량2025.01.231. 단백질 정량 이 실험의 목적은 Lowry-Folin법을 이용하여 수용액에 녹아있는 단백질을 정량하고 흡광도 그래프를 그리는 방법을 익히는 것입니다. 실험 방법에는 BSA 표준곡선 작성, 미지의 단백질 시료 측정, 흡광도 측정 및 분석 등의 단계가 포함되어 있습니다. 2. Lowry-Folin법 Lowry-Folin법은 단백질 정량에 널리 사용되는 방법으로, 구리 이온과 단백질의 반응을 통해 청색 발색 반응이 일어나는 원리를 이용합니다. 이 실험에서는 BSA 표준용액을 이용하여 표준곡선을 작성하고, 미지의 단백질 시료의 농도를 ...2025.01.23
-
SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 실험2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질을 SDS로 변성시켜 모든 단백질이 유사한 전하/분자량 비를 가지도록 만든 후 전기영동을 통해 분리한다. 이 실험에서는 SDS-PAGE의 원리와 사용되는 시약들의 특성을 이해하고, 실제로 단백질 분리 실험을 진행하여 결과를 분석하였다. 2. 단백질 변성 SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어 선형 구조로 만들어 주며, 단백질에 음전하를 부여한다. 이를 통해 단백질의 고유 전하와 상관없이 분자량에 따라 분리할 수 있게 된다. 실험에서는 단백질 시료를...2025.01.03
-
일반생물학실험 결과레포트 [실험9] 핵산과 단백질 정량2025.05.131. 핵산 정량 실험을 통해 추출한 plasmid DNA의 농도를 spectrophotometer로 측정하였다. 측정 결과 DNA 농도는 52.00ug/ml로 나타났다. DNA의 순도를 확인하기 위해 A260/A280과 A260/A230 비율을 계산하였다. A260/A280 비율은 2.080으로 순수한 DNA 범위인 1.8-2.0을 벗어나 있어 DNA가 손상되었거나 오염되었음을 알 수 있다. A260/A230 비율은 0.881로 순수한 DNA 범위인 2.0-2.2를 크게 벗어나 있어 EDTA, 탄수화물, 유기용매 등의 오염이 있는 ...2025.05.13
-
단백질 검출 실험: BCA assay, 뷰렛반응, 닌히드린 반응2025.01.131. 단백질 단백질은 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 복잡한 사슬구조의 고분자 물질이다. 단백질의 존재를 증명하기 위해서는 발색반응을 사용할 수 있는데, 단백질 분자에 포함된 반응기가 특수한 시약과 어울려서 나타내는 반응이다. 2. BCA assay BCA assay는 알칼리의 조건에서 단백질의 펩타이드 결합과 반응하여 Cu2+가 Cu+로 환원되고, 이후 2분자의 Bicinchoninic acid(BCA)가 환원된 Cu+와 배위 결합해 562nm에서 최대 흡광도를 가지는 강한 보라색을 띠는 반응을 이용한다. Cu+의 생성은 곧 단...2025.01.13
-
Protein electro-transfer and Western blot 실험보고서2025.01.161. Western blot Western blot은 찾고자 하는 protein의 antigen epitope와 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(antigen)을 찾아내는 방법이다. 전기 영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어 있는 antibody를 붙여주는 항원-항체 반응을 이용하여 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 2. Nitrocellulose membrane Nitrocell...2025.01.16
4 / 51
