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식물분자생물학실험 Histochemical GUS assay 결과보고서2025.01.181. GUS assay GUS assay는 Escherichia coli β-glucuronidase gene uidA (GUS)를 식물에서 reporter gene으로 활용하는 방법으로, 형광 측정, 분광 광도 측정 또는 조직화학적 기술을 통해 목적 유전자의 발현 위치를 확인할 수 있다. GUS assay는 높은 감도, 효소 안정성, 단순성으로 인해 자주 활용되며, 특히 histochemical staining을 통해 endogenous promoter activity를 관찰하는데 유용하다. 2. GUS 염색 원리 GUS assa...2025.01.18
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(SDS-PAGE, Coomassie Blue Staining)2025.01.231. SDS의 역할 및 원리 SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다. 2. PAGE의 원리 PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다. acrylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교...2025.01.23
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단백질 분석(SDS-PAGE & Fluorescence)2025.05.141. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel eletrophoresis의 약자로, 5~250 kDa 사이의 단백질을 분리할 때 사용되는 방법입니다. SDS는 단백질에 결합하여 전하의 영향을 배제하고 크기에 의해 이동속도가 결정되도록 합니다. 또한 DTT와 같은 reducing agent는 단백질의 disulfide bond를 변성시켜 linear한 1차 구조로 만듭니다. SDS-PAGE 후 단백질을 확인하기 위해 Coomassie Briliant Blue, s...2025.05.14
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[A+ 만점 레포트] 분석화학실험 8. Kastle-Meyer test2025.01.181. Kastle-Meyer test Kastle-Meyer test는 법의학적으로 혈흔을 추정하는 검사이다. 혈흔을 면봉에 묻히기 전에 에탄올을 적셔주는 것은 혈흔을 더 잘 용해하므로 감도와 특이성을 높여 산화-환원 반응을 돕는 역할을 한다. 이외에도 루미놀 반응과 같이 화학 발광(chemiluminescence)을 이용하거나 형광(fluorescence) 현상을 일으켜 확인할 수도 있다. 2. 혈흔 감식 혈흔과 KM reagent의 반응이 가장 빨랐던 이유는 '촉매 작용을 할 수 있는 과산화효소 활성을 지닌 효소류나 일부 금속이...2025.01.18
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Tobacco infiltration full report2025.01.241. Agrobacterium-mediated transformation Agrobacterium-mediated transformation을 이용해 담배잎 내로 목적 유전자를 도입하여 식물 형질전환을 유도하고 세포 내 목적 단백질의 발현을 관찰하였다. A.tumafaciens의 한 strain인 GV3101로 목적 유전자(DGAT1, WRI1, MAGL4, MAGL10)와 reporter gene(eYFP)가 fusion된 Plasmid를 도입하고 이러한 GV3101을 이용해 담배잎 식물 세포의 형질전환을 유도하였다. 2. Col...2025.01.24
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[유기화학실험] TLC 에이플러스 받은 report2025.01.181. Thin Layer Chromatography (TLC) TLC의 원리와 이용 방법을 배운 후 이동상 sample들이 각자 무엇일지 유추해본다. 고정상과 이동상의 absorption을 통해 달라지는 Rf값을 계산하고 sample들의 극성을 비교해 본다. 2. Chromatography 어떠한 시료에서 분리하거나 검출하고 싶은 이동상의 이동거리를 이용하여 물질을 분리하는 것이다. 고정상에 어느정도 adsorption하는지에 따라 이동거리가 달라져 물질이 분리된다. 이동상이란, 고정상에 대해 상대적으로 이동하여 나가는 기체나 액체...2025.01.18
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생화학실험 DNA추출, PCR, Gel전기영동2025.05.061. Genomic DNA Genomic DNA는 핵 내에 존재하는 유기체 내의 chromosomal DNA이며 플라스미드와 같은 염색체 외 DNA와 대조적으로 염색체 DNA이다. A, T, G, C의 염기쌍들이 유전정보를 저장하며 사람의 경우에는 32억 개 이상의 염기쌍을 갖는다. 대부분의 유기체는 모든 세포에서 동일한 유전체 DNA를 가지고 있다. 2. B16F10 cell B16F10 세포는 인간 피부암의 모델로 연구에 사용되는 종양 세포주이다. B16 세포는 전이 및 고체 종양 형성 연구에 유용한 모델이며 전이 연구를 위한 ...2025.05.06
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Cell cycle analysis using fluoresecnce microscopy 형광현미경을 이용한 세포주기 분석2025.01.231. Cell cycle(세포주기) 세포는 세포 분열을 통해 자신과 유전적으로 동일한 두 개의 딸세포를 만든다. 이를 위해서 하나의 모세포는 자신의 DNA를 복제하여 응축시켜 만든 염색체와 세포질을 두 개의 딸세포로 균등하게 분배한다. 이 과정을 형성하는 일련의 주기를 Cell cycle이라고 한다. Eukaryotic cell에서의 세포 분열은 크게 Interphase(간기) 및 Mitosis(M기)로 나뉜다. Interphase(간기)에서는 세포의 성장을 주도하고 Mitosis(M기)에서는 세포에 필요한 핵심 분자들을 선택적으로...2025.01.23
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생물공정실험 결과보고서: Bacterial identification2025.01.041. Bacterial identification 이 실험 보고서는 Durham test와 Gram staining을 통해 샘플 박테리아를 식별하는 내용을 다루고 있습니다. Durham test 결과, 1조의 박테리아는 E. coli로 확인되었고, 2,3조의 박테리아는 Enterococcus faecalis와 Salmonella typhimurium으로 추정되었습니다. Gram staining 결과, 1,2조의 박테리아는 그람 음성균, 3조의 박테리아는 그람 양성균으로 확인되었습니다. EMB agar 실험을 통해 1조의 E. col...2025.01.04
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생화학 실험 보고서 - 형광현미경으로 세포 관찰2025.01.271. 형광현미경 형광현미경은 형광 또는 인광을 이용하여 관찰하는 광학현미경이다. 시료에 존재하는 형광 물질이 흡수하는 특정 파장을 비추었을 때, 형광물질이 흡수한 빛이 형광 형태로 나오는 긴 파장의 빛을 감지하여 관찰할 수 있다. 형광현미경 사용 시에는 현미경 자체의 빛을 차단하기 위해 lamp를 꺼주고, 은색의 대물렌즈를 사용하며 배율은 항상 작은 것에서 큰 것의 순서로 관찰한다. 2. DAPI 염색 DAPI(4', 6-diamidino-2-phenylindole)는 형광 stain이며, DNA를 염색시킨다. DAPI로 염색하면 ...2025.01.27
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