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DNA 추출 및 PCR, PCR 결과 확인(전기영동) 레포트2025.04.251. DNA 추출 DNA 추출 과정에서 Vortexing이나 Tapping을 하지 않고 Inverting하는 이유는 고분자인 gDNA에 물리적인 힘이 크게 가해져 gDNA의 손상이 일어나는 것을 방지하기 위해서이다. gDNA 전기영동 결과에서 Clean band가 나오지 않은 이유는 gDNA가 크기가 무척이나 크기 때문에 일련의 실험 과정에서 많이 부서져 부서진 조각들의 크기가 다양하여 전기영동 시 clean band가 나오지 않고 번진 형태로 나타났기 때문이다. 2. PCR PCR product의 전기영동 결과를 보면 500~60...2025.04.25
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RNA 추출, cDNA 합성 및 qRT-PCR2025.01.181. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA의 상보적 가닥에 결합하는 2개의 프라이머를 동시에 사용하여 증폭을 원하는 DNA의 특정 영역만을 in vitro에서 복제, 증폭하는 기술이다. 3단계를 거쳐 DNA를 복제하는데, 변성, 결합, 신장 과정을 반복하여 DNA를 증폭시킨다. 2. RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR) RT-PCR은 유전자에서 만들어진 RNA에서 역전사효소를 이용하여 cDNA를 생성한 후, cDNA를 주형 가닥으로 PCR을 수행하여, 유전자의 RNA 발현...2025.01.18
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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PCR 예비레포트: 유전자 클로닝을 위한 PCR 증폭2025.11.151. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 유전자 클로닝을 위해 미리 선정한 특정 유전자를 제작된 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭합니다. 이 과정에서 Taq 중합효소, 주형 DNA, Forward/Reverse 프라이머, dNTP 혼합물, 버퍼 등이 사용되며, PCR 기계에서 온도 사이클을 통해 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성 단계를 반복하여 목표 DNA를 기하급수적으로 증폭합니다. 2. 프라이머 (Primer) 프라이머는 DNA 중합효소가 D...2025.11.15
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RNA 분리 및 cDNA 합성, 실시간 PCR을 이용한 개화시기 측정2025.11.121. RNA 분리 (RNA Isolation) 생명과학 실험에서 세포나 조직으로부터 RNA를 추출하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 이 과정은 세포를 용해시키고 단백질과 DNA를 제거하여 순수한 RNA를 얻는 것을 목표로 합니다. 추출된 RNA는 이후 역전사 반응이나 유전자 발현 분석 등 다양한 실험의 기초 재료로 사용됩니다. 2. cDNA 합성 (cDNA Construction) mRNA를 주형으로 하여 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용해 상보적 DNA(complementary DNA)를 합성하는 과정입...2025.11.12
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PCR 프라이머 디자인 실습 가이드2025.11.111. PubMed 논문 검색 PubMed 데이터베이스에 접속하여 RAW 264.7 세포주 관련 프라이머 서열을 검색한다. 검색 시 RT-PCR을 제외하여 일반 PCR 프라이머를 찾는다. Real-time PCR의 경우 PCR 산물이 100~200bp로 작아 클로닝이 어렵기 때문이다. 대학교 이메일을 사용하면 유료 논문도 접근 가능하다. 2. Primer BLAST 분석 NCBI Primer BLAST 도구를 이용하여 PCR 산물의 크기를 예측한다. 논문에서 찾은 프라이머 서열을 입력하고, 생물종을 Homo sapiens에서 Mus ...2025.11.11
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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서울대학교 A+ 생물학 실험 PCR, DNA technology2025.01.281. DNA 기술 DNA 기술은 생명과학 및 생명공학의 핵심적인 도구로, 유전 물질의 분석, 변형 및 조작을 가능하게 한다. 이러한 기술 중 특정 유전자를 vector라 불리는 plasmid에 삽입하고, 그 유전자의 복제본을 생산하는 기술인 DNA cloning, 전기영동을 통한 분석은 유전자 연구와 다양한 생물학적 응용에 있어 중요한 역할을 한다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 세균 내에서 독립적으로 복제할 수 있는 작은 원형 DNA 분자로, 염색체 DNA와는 별개로 존재한다. Plasmid는 외래 유전자를 운...2025.01.28
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Real-time PCR을 이용한 유전자 발현 분석2025.01.231. 전사(Transcription) 수준에서의 유전자 발현 분석 기법들 유전자 발현 분석 기법에는 Single gene analysis와 Whole genome analysis가 있다. Single gene analysis는 개별 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 Northern Blotting과 Real-time PCR이 있다. Whole genome analysis는 세포 내 전체 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 RNA sequencing이 있다. 2. cDNA 합성에 사용될 수 있는 primer의 종류 cDN...2025.01.23
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바이러스 RNA 추출 및 PCR 실험 보고서2025.11.141. RNA 추출 및 정제 바이러스 RNA 추출을 위해 HeLa 세포에 HRV1B를 감염시킨 후 세포를 용해하여 RNA를 분리했다. VB lysis buffer로 세포를 용해하고 AD buffer로 RNA에 염을 결합시켜 침전시킨다. VB column tube의 양전하 필터를 이용해 음전하를 띤 RNA를 분리하고, W1 buffer와 Wash buffer로 세척한 후 Nuclease-free water로 용출했다. 나노드랍을 사용하여 RNA 농도를 측정한 결과 대조군 227.8ng/ul, 실험군 195.2ng/ul로 측정되었다. 2...2025.11.14
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