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식물분자생물학실험 Real-time PCR (Quantitative RT-PCR) 결과보고서2025.01.181. RT-PCR RT-PCR은 RNA 서열을 DNA로 역전사하여 PCR을 통해 증폭하는 기술이다. 이는 RNA 기반 생명체의 유전자 발현 분석에 활용되며, COVID-19 팬데믹 당시 SARS-CoV-2 바이러스 검출에 중요하게 사용되었다. 2. Quantitative RT-PCR Quantitative RT-PCR은 유전자 발현량을 정량화하는 기술로, 실시간으로 형광 신호를 측정하여 유전자 증폭 정도를 확인할 수 있다. SYBR Green과 TaqMan probe 방식이 대표적이며, 각각 장단점이 있다. 3. C3H55 유전자 ...2025.01.18
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PCR 결과레포트: DNA 증폭 및 전기영동 실험2025.11.171. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 특정 DNA 영역을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 YiaT, HiA, tres, Ompc 네 가지 target DNA를 증폭시키기 위해 각각의 forward/reverse primer를 사용하여 PCR mixture를 제작했습니다. 95℃에서 변성, 54℃에서 프라이머 결합, 72℃에서 DNA 합성을 30 사이클 반복하는 온도 조건을 적용했으며, lid 온도를 105℃로 유지하여 튜브 내 온도 균일성을 확보하고 증발로 인한 반응 손실을 방지했습니다. 2. 전기영동 ...2025.11.17
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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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구강상피로부터 유전자의 추출 (HKG 이용 PCR & 전기영동) 실험 보고서2025.05.141. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA를 증폭하는 기술로, 3단계(Denaturation, Annealing, Extension)로 구성되어 있다. Denaturation 단계에서는 dsDNA가 ssDNA로 분리되고, Annealing 단계에서는 Primer가 ssDNA에 결합한다. Extension 단계에서는 Taq Polymerase가 Primer를 시작점으로 DNA를 합성한다. 이 과정이 반복되면서 DNA가 지수적으로 증폭된다. 2. 전기영동 (Electrophoresis) 전기영동은 D...2025.05.14
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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 예비레포트2025.01.191. Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR은 Denaturation, Annealing, Extension 등의 과정을 거쳐 특정 DNA 영역을 증폭시키는 분자 생물학적 기술이다. PCR 기법에는 다양한 종류가 존재하며, 민감도 상승을 위한 Nested PCR, 미지 영역의 서열 확인을 위한 Inverse PCR, RNA를 분석하는 RT-PCR 등이 있다. PCR에 필요한 구성 요소는 내열성 DNA polymerase, 2가 양이온, dNTP, 주형 DNA, Buffer, forward/reverse pr...2025.01.19
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식품 생화학 실험 real time qPCR과정과 결과값2025.01.141. GAPDH GAPDH 유전자는 glyceraldehyde-3-phosphate 탈수소효소 단백질 계열의 구성원을 암호화한다. 암호화된 단백질은 기계적으로 구별되는 능력을 기반으로 월광 단백질로 확인되었다. 이 유전자의 산물은 무기 인산염과 nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)의 존재 하에서 glyceraldehyde- 3-phosphate의 가역적 산화적 인산화인 탄수화물 대사에서 중요한 에너지 생성 단계를 촉매한다. 암호화된 단백질은 핵에서 uracil DNA glycosylase 활성을 갖...2025.01.14
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RT-reaction & qPCR을 이용한 p21 단백질 발현 분석2025.11.171. 역전사 반응(RT-reaction)과 cDNA 합성 역전사효소는 RNA를 주형으로 하여 DNA를 합성하는 효소이며, 결과물인 cDNA는 mRNA의 상보적 DNA이다. cDNA는 전사 가능한 엑손 영역만 포함하고 인트론이 제거되어 있어 genomic DNA와 다르다. RT-reaction에서는 Random Hexamer, dNTPs, RNase inhibitor, Reverse transcriptase 등을 사용하여 mRNA로부터 cDNA를 합성한다. 이 기술은 cDNA 라이브러리 제작과 RT-PCR 등 분자생물학의 핵심 기술에...2025.11.17
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PCR을 통한 DNA 증폭 및 전기영동 실험2025.11.141. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA를 증폭하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 실험에서는 10배 PCR 완충액, dNTP, 프라이머, Taq DNA Polymerase 등의 시약을 사용하여 반응 혼합물을 준비합니다. 템플릿 DNA를 추가한 후 열 사이클러에서 변성, 어닐링, 연장 단계를 반복하여 DNA를 지수적으로 증폭합니다. Taq Polymerase의 확장 속도는 1kb/1분이며, 최소 연장 시간은 30초입니다. PCR은 민감도가 높아 적은 양의 DNA 오염도 실험에 큰 영향을 미치므로 주의가 필요합니다. 2. D...2025.11.14
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유전자 발현 분석을 위한 RT-PCR 실험2025.01.041. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 target DNA의 특정 염기서열을 복제하는 기술로, template DNA, primer, dNTP, DNA 중합효소 등이 필요합니다. 온도 조절을 통해 DNA 변성, primer 결합, 신장 단계를 반복하여 DNA 단편을 기하급수적으로 증폭할 수 있습니다. 2. real-time PCR real-time PCR은 PCR 과정 중 증폭되는 DNA를 실시간으로 모니터링할 수 있는 기술입니다. 형광 검출법을 사용하여 증폭되는 DNA 양을 정량적으로 분석할 수 있습니다. 이를 통해 초기 DN...2025.01.04
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PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 결과 보고서2025.01.151. PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 이 보고서는 PCR 기술을 사용하여 특정 인간 DNA를 증폭하고 검출하는 실험 결과를 설명합니다. 실험에서는 구강 상피 세포에서 DNA를 추출하고, 특정 프라이머를 사용하여 DNA를 증폭한 후 전기영동을 통해 분석했습니다. 실험 결과, 두 개의 샘플에서 250bp 부근에서 강한 발현이 관찰되었으며, 이 중 하나는 wild type, 다른 하나는 mutant type의 DNA인 것으로 확인되었습니다. 이 실험을 통해 PCR의 기본 원리와 UV-transilluminat...2025.01.15
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