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PCR 기법을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 실험 보고서2025.05.141. PCR (중합효소 연쇄 반응) PCR은 1983년 K.B.Mullis에 의해 고안된 방법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전자를 증폭하는 기술이다. PCR을 통해 미량의 DNA 시료에서 목적 DNA 영역을 수시간에 20만~50만배로 증폭할 수 있으며, 이는 현재 유전물질을 조작하는 거의 모든 과정에서 사용되고 있다. PCR은 인간의 DNA를 증폭하여 유전질환을 진단하거나, 세균이나 바이러스의 DNA를 증폭하여 감염성 질환을 진단하는 데 사용될 수 있다. 2. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 크기, 전하 또는 구조가 다른 DN...2025.05.14
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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 예비레포트2025.01.191. Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR은 Denaturation, Annealing, Extension 등의 과정을 거쳐 특정 DNA 영역을 증폭시키는 분자 생물학적 기술이다. PCR 기법에는 다양한 종류가 존재하며, 민감도 상승을 위한 Nested PCR, 미지 영역의 서열 확인을 위한 Inverse PCR, RNA를 분석하는 RT-PCR 등이 있다. PCR에 필요한 구성 요소는 내열성 DNA polymerase, 2가 양이온, dNTP, 주형 DNA, Buffer, forward/reverse pr...2025.01.19
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[충남대] 분자생물, 생화학 실험 보고서12025.01.281. 대장균 배양 실험에서는 대장균(Escherichia coli, E. coli.)을 이용하여 실험을 진행하였다. 대장균은 정온동물의 창자에서 많이 볼 수 있는 박테리아로 단백질 발현에 대해 가장 일반적인 숙주이다. 대장균은 실험실에서 보관과 배양이 용이하다는 장점이 있어 주로 사용하는 원핵생물 모델이며, 자가복제를 하는 DNA 고리인 Plasmid DNA를 가지고 있다. 이는 DNA vector(운반체)로써 유전자 재조합 기술의 중요한 재료이다. 2. 배지 제조 실험에서는 TB(Terrific broth) 배지를 사용하였다. T...2025.01.28
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[충북대 A+, 보고서 점수 2등] 종이 크로마토그래피에 의한 물질 분리 보고서2025.01.161. 크로마토그래피 크로마토그래피는 혼합물을 흡착제(absorbent)에 대한 친화도의 차 즉, 분별흡착 현상을 이용하여 분리, 정제, 정성 및 정량분석을 할 수 있는 방법으로 성질이 비슷한 물질이 섞여있거나 그 섞여있는 양이 적을 때에 효과적으로 분리할 수 있으며 조작이 간단하고 소요 시간이 짧은 실험 방법이다. 크로마토그래피의 기본 원리는 샘플이 흐르는 이동 상에 따라 구성 성분들이 분리되는 것이다. 크로마토그래피는 이동상의 상태에 따라 기체크로마토그래피(GC)와 액체 크로마토그래피(LC)로 나뉘며, 고정상의 상태에 따라 컬럼 ...2025.01.16
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Plasmid purification & DNA 정량 A+ report2025.01.171. Plasmid DNA transformation Plasmid DNA transformation이란 특정 종의 세포에 외부 유전자를 도입하여 그 세포가 새로운 유전자 정보를 표현하도록 하는 과정이다. 간단히 말해, ligation된 plasmid를 숙주세포 안으로 넣어주는 것이다. 일반적으로, plasmid는 작은 원형 DNA 조각으로서 bacteria와 같은 원핵생물의 세포외부에서도 독립적으로 복제할 수 있는 DNA이다. 특정 유전자 조각을 plasmid에 삽입한 후, host cell에 도입해서 해당 유전자가 host ce...2025.01.17
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인천대학교 나노바이오실험(1) Genomic DNA prep & Gel Electrophoresis2025.01.141. Genomic DNA Genomic DNA는 염색체 DNA로, Plasmid DNA와 같은 Extra-chromosomal DNA와 대조되는 개념이다. 대부분의 생물은 모든 세포에서 같은 Genomic DNA를 갖지만, 특정 gene의 발현으로 cell type과 function이 달라진다. 어떤 organism의 genomic DNA인지에 따라 바이러스, 박테리아, 진핵생물 등의 특성을 지닌다. 2. DNA 추출 방법 DNA 추출은 Lysis, Precipitation, Purification 3단계로 이루어진다. Lysis...2025.01.14
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식물분자생물학실험 Real-time PCR (Quantitative RT-PCR) 결과보고서2025.01.181. RT-PCR RT-PCR은 RNA 서열을 DNA로 역전사하여 PCR을 통해 증폭하는 기술이다. 이는 RNA 기반 생명체의 유전자 발현 분석에 활용되며, COVID-19 팬데믹 당시 SARS-CoV-2 바이러스 검출에 중요하게 사용되었다. 2. Quantitative RT-PCR Quantitative RT-PCR은 유전자 발현량을 정량화하는 기술로, 실시간으로 형광 신호를 측정하여 유전자 증폭 정도를 확인할 수 있다. SYBR Green과 TaqMan probe 방식이 대표적이며, 각각 장단점이 있다. 3. C3H55 유전자 ...2025.01.18
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생화학 실험 보고서 - PCR2025.01.271. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합효소 연쇄반응으로, 열을 가하여 DNA의 특정 부분을 증폭시키는 기술이다. reverse transcription PCR은 mRNA에 대해 PCR을 적용하기 위한 방법으로, mRNA를 역전사시켜 cDNA를 합성하고 primer와 DNA polymerase를 이용해 DNA의 일부분을 복제, 증폭시킨다. PCR은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행되며, 주형 DNA, primer, dNTP, DNA polymerase가 ...2025.01.27
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미세조류의 DNA 추출2025.01.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 시험관 내에서 DNA 분자의 특정 염기 서열을 선택적으로 빠르게 증폭하는 기술로, DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. PCR은 유전자 연구, 질병 진단 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. DNA 추출 DNA 추출은 생물로부터 전체 유전체 DNA를 추출하는 과정으로, 이번 실험에서는 spin column 방식을 사용하였습니다. 세포 용해, DNA 결합, 세척, 용출의 단계를 거쳐 DNA를 추출하였습니다. 3. 전기영동 전기영동은 DNA 분자를 크기에 따...2025.01.13
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