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플라스미드 DNA 추출 예비 레포트2025.01.031. 플라스미드 DNA 추출 이 예비 레포트는 플라스미드 DNA 분리 방법을 이해하고 순수한 플라스미드 DNA를 추출하는 실험을 설명합니다. 플라스미드는 세균의 염색체 외부에 존재하는 독립적으로 증식할 수 있는 DNA 분자로, 유전자 클로닝, 유전자 전달, 유용 단백질 생산 등에 활용됩니다. 플라스미드 DNA 추출 방법에는 크기 차이와 구조 차이를 이용하는 방법이 있으며, 주로 알칼리 변성법을 사용합니다. 이 실험에서는 세포 용해, 단백질 제거, DNA 정제 등의 과정을 거쳐 순수한 플라스미드 DNA를 얻는 방법을 설명하고 있습니다...2025.01.03
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효소학_경북대_족보_기말고사2025.05.031. 보조효소 보조효소에는 Ubiquinone, flavin, pyrimidine nucleotide, lipoic acid, glutathione, coenzyme A, porphyrin, SAM 등 10개가 있다. 이들 보조효소는 효소 단백질에 결합하여 효소의 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하는 역할을 한다. 2. 금속이온의 역할 금속이온은 효소 단백질에 결합하여 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하고, 기질과 결합하여 기질-금속 복합체를 형성하여 기질로 작용하게 하는 등 4가지 역할을 한다. 3. 분광학적 방법 분광학적...2025.05.03
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산성탈인산가수분해효소의 분리 및 정제 결과보고서2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 이 실험의 목적은 세포 또는 조직(맥아)으로부터 산성 탈인산가수분해효소를 추출하고 정제하여 효소 활성도를 측정하는 것입니다. 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 합니다. 이 효소는 특정 기질(PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매합니다. 실험에서는 원심분리와 여과를 통해 효소를 포함한 상층액을 분리하고, MgCl2와 (NH4)2SO4를 이용한 염석 효과로 효소를 정제하였습니다. 2. 원심분리기 사용 원심분리기 사용 시 주의할 점은 로터의...2025.01.23
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산성 탈인산가수분해효소의 활동도측정 및 정량2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며, 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 한다. 이 효소는 특정 기질(예: p-니트로페닐 인산염, PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매한다. 이 실험의 기질인 PNPP는 가수분해되면 노란색 화합물인 p-니트로페놀을 생성하며, 이 변화를 통해 효소의 활성을 측정할 수 있다. 산성 탈인산가수분해효소는 pH 5.0 이하의 산성 조건에서 가장 잘 작용한다. 2. 효소 활성 측정 및 정량 분석 PNPP를 이용한 효소 활성 측정: 산성 탈인산가수분해...2025.01.23
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(SDS-PAGE, Coomassie Blue Staining)2025.01.231. SDS의 역할 및 원리 SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다. 2. PAGE의 원리 PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다. acrylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교...2025.01.23
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)2025.01.231. Column chromatography 크로마토그래피는 주어진 시료 중 정량 분석하고자 하는 성분을 분리하고 확인하는 수단으로, 여러 다른 화합물들이 상이한 두 가지 phases 간에 분포되어 있거나 어느 물질 내의 분리 가능한 부위들 사이에 분포되어 있을 때 그 분포된 정도가 화합물들끼리 서로 다르다는 사실에 기초한 방법이다. 한 가지 상은 정지상(stationary phase)이고 다른 상은 이동상(mobile phase)이다. 이동상은 정지상을 일고 있는 물질 위로 흐르는데, 분리될 시료는 이 이동상을 따라 운반된다. 시...2025.01.23
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Ion Exchange Column Chromatography2025.01.211. Alkaline Phosphatase (AP) Alkaline Phosphatase (AP)는 인산기(phosphate group)을 떼어내는 기능을 하며, alkaline condition에서 활성을 띠는 특징을 가진다. AP는 E. coli의 outer membrane과 inner membrane 사이의 periplasmic space에 존재한다. 2. Protein Purification AP를 정제하기 위해 osmotic shock, centrifuge, dialysis, heat inactivation 등의 과정을 거...2025.01.21
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Protein electro-transfer and Western blot 실험보고서2025.01.161. Western blot Western blot은 찾고자 하는 protein의 antigen epitope와 반응하는 antibody를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(antigen)을 찾아내는 방법이다. 전기 영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어 있는 antibody를 붙여주는 항원-항체 반응을 이용하여 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 2. Nitrocellulose membrane Nitrocell...2025.01.16
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단백질 분석(SDS-PAGE & Fluorescence)2025.05.141. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel eletrophoresis의 약자로, 5~250 kDa 사이의 단백질을 분리할 때 사용되는 방법입니다. SDS는 단백질에 결합하여 전하의 영향을 배제하고 크기에 의해 이동속도가 결정되도록 합니다. 또한 DTT와 같은 reducing agent는 단백질의 disulfide bond를 변성시켜 linear한 1차 구조로 만듭니다. SDS-PAGE 후 단백질을 확인하기 위해 Coomassie Briliant Blue, s...2025.05.14
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제하기 - 분자생물학 실험 예비보고서2025.01.041. 플라스미드 정제 이 실험에서는 박테리아 세포로부터 플라스미드를 정제하는 과정이 설명되어 있습니다. 플라스미드는 박테리아 세포 내에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 조작 실험에 많이 사용됩니다. 이 실험에서는 플라스미드를 추출하고 정제하는 단계별 과정이 자세히 기술되어 있습니다. 2. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 진행된 것으로, 유전자 조작 및 분석을 위한 기본적인 실험 기법들이 소개되어 있습니다. 플라스미드 정제 외에도 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 분자생물학 실험 기법들이 포함되어 있...2025.01.04
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