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단백질의 정량분석2025.05.051. 단백질 정량 분석 이 실험에서는 Lowry method와 Bradford method를 사용하여 단백질의 농도를 측정하였습니다. Lowry method는 단백질의 아마이드결합에 의한 구리이온의 환원을 토대로 측정하는 방식이며, Bradford method는 Coomassie Brilliant Blue 염색약이 단백질과 결합하여 색이 변하는 것을 이용하는 방식입니다. 실험 결과, 각 미지시료의 단백질 농도가 다르게 나온 것으로 보아 시료 간 단백질 함량의 차이가 있음을 알 수 있었습니다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석...2025.05.05
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일반생물학실험 결과레포트 [실험9] 핵산과 단백질 정량2025.05.131. 핵산 정량 실험을 통해 추출한 plasmid DNA의 농도를 spectrophotometer로 측정하였다. 측정 결과 DNA 농도는 52.00ug/ml로 나타났다. DNA의 순도를 확인하기 위해 A260/A280과 A260/A230 비율을 계산하였다. A260/A280 비율은 2.080으로 순수한 DNA 범위인 1.8-2.0을 벗어나 있어 DNA가 손상되었거나 오염되었음을 알 수 있다. A260/A230 비율은 0.881로 순수한 DNA 범위인 2.0-2.2를 크게 벗어나 있어 EDTA, 탄수화물, 유기용매 등의 오염이 있는 ...2025.05.13
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Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 예비레포트2025.01.221. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 시료 내 단백질의 양, 농도를 측정하기 위해 사용되는 방법으로 Lowry method, UV method, BCA method, Bradford method 등이 있다. Lowry method는 단백질의 펩타이드 결합이 알칼리성 조건에서 구리와 반응하는 Biuret 반응과 Folin-Ciocalteu 반응을 이용하는 방법이다. UV method는 단백질의 방향족 아미노산이 자외선을 흡수하는 특성을 이용하며, BCA method는 Lowry method의 Biuret 반응을 기반으로 한다. ...2025.01.22
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서강대학교 일반생물학실험1 실험 6. GFP 단백질과 단백질 정량 (Protein Measurements)2025.01.021. 단백질 정량 방법 실험에서는 Lowry assay와 Extinction coefficient assay 두 가지 단백질 정량 방법을 사용하여 EGFP의 질량농도를 측정하였다. Lowry assay는 Biuret reaction과 Folin reaction을 거쳐 750nm에서 흡광도를 측정하고 BSA 표준곡선을 이용하여 EGFP 농도를 계산하였다. Extinction coefficient assay는 EGFP의 몰흡광계수와 Lambert-Beer's Law를 이용하여 488nm에서 EGFP 농도를 직접 계산하였다. 두 방법의 ...2025.01.02
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[생화학실험]단백질 정량(Lowry 법)2025.05.041. 단백질 정량(Lowry법) Lowry법은 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu^{2+} 이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. Cu^{2+} 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시켜 강한 푸른색을 생성한다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01～1.0㎎/㎖의 경우에 측정 가능하다. 2. Biuret 반응 두 개 이상의 펩티드 결합을 갖는 화합물들은 알칼리성 용액에서 황산구리로 처리하면...2025.05.04
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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온도와 pH가 효소작용에 미치는 영향2025.01.021. 효소 작용 효소는 대부분 단백질로, 반응물이 생성물을 만들 때 에너지 장벽을 낮추어 반응속도를 증가시킵니다. 한가지 효소는 특정 기질에만 결합하여 반응을 촉매합니다. 이때 기질의 농도가 높고 온도 및 pH 등이 최적일 때 반응속도는 효소의 농도에 비례하는데, 이 최적은 효소마다 다릅니다. 인간의 생체 내에 존재하는 효소의 최적 온도는 30도에서 40도 사이, 평균적 37도를 웃돌지만, 최적 pH의 경우에는 작용하는 효소와 그 효소가 작용하는 곳에 따라 다릅니다. 2. 달걀 흰자와 펩신 달걀 흰자를 사용한 이유는 달걀의 흰자가 ...2025.01.02
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SDS-PAGE 이론2025.05.071. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis의 약자이다. SDS는 음이온성 계면활성제의 일종으로 단백질의 가용화제로서 이용되고 있으며 단백질의 전기영동에서 SDS-PAGE법이 가장 일반적인 방법으로 이용된다. SDS-PAGE의 원리는, 단백질을 구성하는 아미노산에 의해서 +,- 상관없이 어느쪽이건 전하를 띄지만 SDS가 결합함으로써 일시적으로 단백질이(-)하전을 띄어 모든 분자를 양극으로 이동시키고, gel의 pore 사이즈에 의해서...2025.05.07
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Gel 제조 (SDS-PAGE 실험을 위한 사전 준비) 보고서2025.01.131. 전기영동 전기영동은 DNA와 단백질과 같은 생체 고분자들을 분리 및 정제하는 방법입니다. 전기영동 원리는 음전하를 띄고 있는 생체고분자(DNA/단백질)들에게 전기적 힘(-음전하 ->＋양전하)을 가해주어, 물질이 사이즈에 따라 분리되는 것입니다. DNA 전기영동과 단백질 전기영동(SDS-PAGE)의 차이는 DNA는 음전하를 띄고 있어 Agarose(한천) Gel에서 관찰할 수 있지만, 단백질은 양, 음전하를 갖고 있어 SDS-sample buffer와의 혼합이 필요하며 Poly Acrylamide gel에서 관찰할 수 있습니다....2025.01.13
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생명과학실험1 ELISA2025.01.171. ELISA 실험의 원리 ELISA 실험은 항원-항체 결합 반응과 효소를 이용한 발색 반응을 통해 특정 항원의 존재 여부 및 농도를 분석하는 기법이다. 항체와 항원의 특이적 결합과 효소-기질 반응을 이용하여 목표 항원을 검출할 수 있다. 2. ELISA의 종류 ELISA에는 Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA 등 다양한 방식이 있다. 각 방식은 항원과 항체의 배치와 사용되는 항체의 수에 따라 차이가 있다. Indirect ELISA는 2차 항체를 사용하여 다양한 1차 항체에 대한 검출...2025.01.17
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