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[A+레포트] DNA 제한효소 예비레포트2025.01.221. 제한효소 제한효소는 생물이 자기 세포에 다른 종류의 DNA가 들어오면 이를 파괴하는 기능을 가진 효소이다. 유전공학에서는 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소로 알려져 있다. 제한효소에는 크게 3종류가 있으며, 모두 특정한 DNA 염기 배열을 인식한다. 유전공학에서 잘 사용되는 것은 II형 제한효소이며, 절단부위가 인식부위의 가운데 위치하는 것이 특징이다. 2. 아가로스 겔 전기영동 전기영동은 DNA와 같은 전하를 띠는 물질들을 전기적으로 일정한 방향으로 이동시켜 분리하는 기술이다. DNA는 인산기에서 H+를 방출...2025.01.22
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Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis 레포트2025.05.041. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합 효소 연쇄반응이라 불린다. 캐리 멀리스에 의하여 1985년에 개발된 중합 효소 연쇄반응(PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법이다. PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제 및 증폭시키는 분자생물학적 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같이 매우 복잡하고 양이 적은 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정 DNA 단편만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. Tm은 프라이머 용융 온도라고 한다. 모든 프라이머는 거의 동일한 온도...2025.05.04
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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PCR 기술을 이용한 PCR product 전기영동 확인2025.01.031. PCR 기술 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 복제를 위한 기술로, DNA 주형, 프라이머, DNA 뉴클레오타이드, Taq DNA 중합효소, DNA 중합효소 완충용액 등을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 이 실험에서는 PCR을 통해 유전자를 확보하고, 전기영동을 통해 증폭된 DNA를 확인하며, PCR 뉴클레오타이드를 정제하는 과정을 수행한다. 2. 전기영동 전기영동은 아가로스 겔과 같은 고분자 물질로 된 겔을 이용하여 핵산이나 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산은 음전하를 띠므로 양극 쪽으로 이동하며...2025.01.03
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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.061. DNA 및 단백질 분리 이 실험은 전기영동법을 통해 DNA나 단백질과 같은 고분자 물질을 분리하는 방법을 이해하고자 합니다. 아가로스 젤을 만들어 보면서 그 특징을 알아보고, 전기영동에 필요한 시료의 역할과 DNA 분자의 크기에 따른 이동 속도를 관찰합니다. 2. 아가로스 젤 전기영동 원리 DNA는 음전하를 띄고 있어 전기장 아래에서 양극 쪽으로 이동합니다. 이때 DNA 분자량이 클수록, 아가로스 농도가 높을수록, 구조가 복잡할수록 이동 속도가 느려집니다. 전압이 높을수록, 완충액 성분과 이온강도에 따라 이동 속도가 달라집니다...2025.01.06
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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전기 영동 실험보고서 및 심화탐구활동2025.01.201. 전기영동 실험 전기영동 실험을 통해 이온 샘플 3종이 이동하는 것을 관찰하였다. 크기가 작은 이온일수록 겔을 통과하는 속도가 빠른데, 이는 분자의 크기, 전하, 용액의 점성도 등과 관련이 있다. 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생체 고분자를 분리, 분석하는 데 중요한 방법이다. 2. 전기영동 이론 전기영동에서 분자의 이동속도 v는 전기 장력과 전체전하에 비례하지만, 분자의 크기와 용액의 점성도에는 반비례한다. 이를 수식으로 표현하면 v=Eq/d6πrη 이다. 이 실험을 통해 전기영동의 기본 원리와 이론을 이해할 수 있...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <14주차. 단백질 분석 (SDS-PAGE)> 레포트2025.01.201. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)를 이용해 단백질에 음전하를 부여함으로써 Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)를 수행하여 단백질을 크기에 따라 분리하는 전기영동 방법입니다. SDS-PAGE는 일반적으로 5~250 kDa 범위의 단백질을 분리하는 데 사용되며, 이 방법을 통해 단백질의 구조와 전하가 이동 속도에 미치는 영향을 제거할 수 있습니다. SDS에 의해 음전하를 띤 선형화 된 단백질은 전기장을 가했을 때 양극(+)을 향해 이동하며, ...2025.01.20
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