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RNA와 식물 RNA 중합효소2025.01.141. RNA의 구조적 특징 RNA는 DNA와 구조적으로 다른 점이 있는데, 리보오스 탄소 2'에 수산화기가 존재하고 티민 대신 유라실을 이용하는 등의 차이가 있다. 또한 RNA는 단백질과 같이 접힘을 통해 3차원 구조를 형성할 수 있다. 2. RNA의 종류 RNA에는 mRNA, tRNA, rRNA 등 다양한 종류가 있다. mRNA는 DNA의 유전정보를 리보솜에 전달하여 단백질 합성을 돕고, tRNA와 rRNA는 단백질 번역에 관여한다. 또한 miRNA, lncRNA 등 유전자 발현을 조절하는 비번역 RNA도 존재한다. 3. RNA ...2025.01.14
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핵산의 구조와 기능2025.05.071. 핵산의 구조와 기능 핵산은 1869년 프리드리히 미셰르에 의해 발견되었으며, 모든 생명체에 필수적인 유전물질로 DNA와 RNA의 두 종류가 존재한다. 핵산은 생명체의 핵 속에서 유전정보를 암호화하여 대부분의 단백질, 세포 내 구성성분, 생명유지에 필요한 모든 물질을 만들 수 있는 정보를 가지고 있다. 또한 한 세대에서 다른 세대로 유전정보를 전달하는 역할을 담당한다. 2. 뉴클레오타이드의 구조 뉴클레오타이드는 질소 염기, 5탄당, 인산염의 세 가지 특징적인 구성성분을 가지고 있다. DNA의 뉴클레오타이드 단위는 A, G, T,...2025.05.07
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재결합 단백질의 발현/ Expression of recombinant proteins in E. coli2025.01.121. GST-tagged Proteins glutathione S-transferase (GST), histidine (HIS), 기타 친화성 태그를 이용하여 단백질을 정제하게 되면 기존에 잘 알려진 생화학적 특성을 가진 단백질과 알려지지 않은 생화학적 특성을 가진 재조합 단백질의 N 말단에 결합하여 정제를 도와준다. GST 단백질은 번역 시에 안정적이고 가용성이 높은 단백질로 빠르게 접히기 때문에, GST 태그를 포함하면 태그가 없을 때보다 더 잘 발현하고 용해도를 촉진하는 경우가 많다. 2. BCA assay BCA는 Lowry...2025.01.12
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Protein Regulation2025.01.181. Auxin-induced degron system Auxin-induced degron system은 특정 target protein을 원하는 상황에서 제거하기 위해 사용되는 방식으로, AID가 결합된 protein과 OsTir1이 같이 존재할 경우에 IAA(auxin)가 존재하지 않을 경우에는 정상적으로 protein이 존재할 수 있지만, IAA가 존재할 경우 IAA가 AID와 OsTir1을 연결하는 bridge 역할을 하고 polyubiquitin 구조가 형성되며 이는 이후 proteosome에 의해 빠르게 분해되어 pro...2025.01.18
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A+ 생화학실험 <10주차. Cloning> 레포트2025.01.201. Molecular Cloning Molecular cloning은 분자 생물학에서 recombinant DNA를 생성하고 숙주 내에서 replication을 수행하는 실험적인 기법입니다. 이 기법의 주된 목적은 target 유전자(insert)를 plasmid DNA(vector)에 넣어 대량의 target 유전자 또는 해당 유전자로 인해 발현되는 단백질을 얻는 것입니다. 일반적으로, 서로 다른 유기체에서 얻은 DNA sequence를 사용하며, 하나의 유기체는 cloning되는 DNA의 source 역할을 하며, 다른 유기체...2025.01.20
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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단백질 정제2025.01.231. 재조합 단백질 발현 재조합 단백질 기법은 정제하려고 하는 단백질의 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입한 후, 이 플라스미드 벡터를 다시 세포에 도입하면 그 세포가 도입된 외부 유전자를 마치 원래 자기가 가지고 있던 유전자인 것처럼 발현을 하는 방법이다. 이번 단백질 정제실험에서 사용하는 플라스미드인 pET28a Vector는 kanamycin이라는 항생제에 대한 저항성을 부여하는 유전자인 KanR을 갖고 있어, 배양액에 kanamycin 항생제를 넣어놓고 그곳에 대장균을 넣으면 KanR을 갖고 있는 플라스미드인 pET28a Vec...2025.01.23
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대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
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Immunohistochemistry (IHC) 실험 보고서2025.01.181. 면역 염색법 면역 염색법(Immunostaining)은 세포 또는 조직에서 특정 분자, 단백질 등을 항체를 이용해 가시화하는 방법으로, 특정 단백질에 선택적으로 결합하는 항체를 세포나 조직에 반응시킨 후, 항체의 결합 반응 후 그 항체의 위치를 관찰하는 생화학적인 방법이다. 면역염색법의 종류로는 면역 조직 화학 염색법 (immunohistochemistry, IHC), 면역 세포 화학 염색법 (immunocytochemistry, ICC), 면역 형광법 (immunofluorescence, IF) 등이 존재한다. 2. IHC ...2025.01.18
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효소학_경북대_족보_기말고사2025.05.031. 보조효소 보조효소에는 Ubiquinone, flavin, pyrimidine nucleotide, lipoic acid, glutathione, coenzyme A, porphyrin, SAM 등 10개가 있다. 이들 보조효소는 효소 단백질에 결합하여 효소의 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하는 역할을 한다. 2. 금속이온의 역할 금속이온은 효소 단백질에 결합하여 활성이나 안정성에 필요한 구조를 유지하고, 기질과 결합하여 기질-금속 복합체를 형성하여 기질로 작용하게 하는 등 4가지 역할을 한다. 3. 분광학적 방법 분광학적...2025.05.03