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재결합 단백질의 발현/ Expression of recombinant proteins in E. coli2025.01.121. GST-tagged Proteins glutathione S-transferase (GST), histidine (HIS), 기타 친화성 태그를 이용하여 단백질을 정제하게 되면 기존에 잘 알려진 생화학적 특성을 가진 단백질과 알려지지 않은 생화학적 특성을 가진 재조합 단백질의 N 말단에 결합하여 정제를 도와준다. GST 단백질은 번역 시에 안정적이고 가용성이 높은 단백질로 빠르게 접히기 때문에, GST 태그를 포함하면 태그가 없을 때보다 더 잘 발현하고 용해도를 촉진하는 경우가 많다. 2. BCA assay BCA는 Lowry...2025.01.12
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pn junction 에너지밴드2025.05.081. p-n Junction의 정성적 설명 반도체 p-n 접합의 형성 원리를 정성적으로 설명하였습니다. p-n 접합이 형성되면 n형과 p형 사이에 에너지 밴드의 휘어짐이 발생하여 에너지 장벽이 생성됩니다. 이 에너지 장벽으로 인해 전자의 이동이 제한되어 전류가 잘 흐르지 않게 됩니다. 2. p-n Junction의 정량적 설명 p-n 접합부에서의 푸와송 방정식을 풀이하여 열평형 상태에서의 에너지 다이어그램을 도출하였습니다. 공핍층 내부의 전하 밀도 분포와 전계 분포를 분석하여 에너지 밴드 구조를 정량적으로 설명하였습니다. 3. p-...2025.05.08
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Proteomics 중간 레포트입니다.2025.05.081. Human Epidermal growth factor (hEGF) Recombinant protein hEGF는 53개의 아미노산 펩티드로 구성된 단백질로, 세 개의 이황화 결합을 가지고 있습니다. hEGF는 EGFR 수용체에 결합하여 세포 증식, 분화, 이동과 관련된 주요 유전자의 활성화를 포함한 세포 내 신호 전달 경로를 개시합니다. 내인성 농도의 hEGF 생산이 매우 낮기 때문에(50ng/mL), 재조합 DNA 기술을 기반으로 대량의 hEGF를 생산하여 효율성과 생산성을 높이고 있습니다. hEGF 재조합 단백질 생산은 D...2025.05.08
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A+ 생화학실험 <10주차. Cloning> 레포트2025.01.201. Molecular Cloning Molecular cloning은 분자 생물학에서 recombinant DNA를 생성하고 숙주 내에서 replication을 수행하는 실험적인 기법입니다. 이 기법의 주된 목적은 target 유전자(insert)를 plasmid DNA(vector)에 넣어 대량의 target 유전자 또는 해당 유전자로 인해 발현되는 단백질을 얻는 것입니다. 일반적으로, 서로 다른 유기체에서 얻은 DNA sequence를 사용하며, 하나의 유기체는 cloning되는 DNA의 source 역할을 하며, 다른 유기체...2025.01.20
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DNA cloning 방법/enzyme, transformation, selection mark/생화학 보고서2025.01.201. DNA cloning 방법 DNA cloning은 타깃 유전자를 박테리아의 게놈에서 잘라내어 plasmid에 삽입하는 과정입니다. 이 과정에서 restriction enzyme을 사용하여 유전자를 자르고, ligase를 사용하여 유전자를 plasmid에 붙입니다. 이렇게 만들어진 recombinant vector는 박테리아에 형질전환되어 증폭됩니다. 형질전환 과정에서는 열처리를 통해 세포막을 열어 plasmid가 들어가게 하며, 항생제 내성 유전자를 선별 마커로 사용하여 형질전환된 세포를 선별합니다. 2. Enzyme 사용 D...2025.01.20
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인공신장실 처치 및 검사: 복막평형검사와 조혈제 투약2025.11.121. 복막평형검사(PET) 복막평형검사는 혈장과 투석액 사이의 용질 투과율을 측정하여 복막의 특성을 검사하는 방법입니다. 2.5% 포도당 투석액을 이용하여 0시간, 2시간, 4시간의 저류 시간에 투석액과 혈액 검사물을 채취합니다. 이를 통해 creatinine과 glucose의 복막투석액과 혈청 내 비율을 측정하여 peritoneal membrane의 clearance와 ultrafiltration rate를 평가하고, 투석의 효율성을 확인하며 개개인의 복막 특성에 맞는 투석방법을 결정합니다. 2. 조혈제(Recombinant Hu...2025.11.12
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DNA ligation, Transformation, Mini-scale preparation of plasmid DNA2025.01.221. DNA ligation DNA ligation은 T4 DNA ligase 효소를 이용하여 DNA 말단을 phosphodiester 결합으로 연결하는 과정이다. 이 과정에서 vector와 insert의 ligation, vector의 self-ligation, insert의 self-ligation 등 세 가지 형태가 나타날 수 있다. 본 실험에서는 HindⅢ와 NdeⅠ로 double-digestion한 vector와 insert를 T4 DNA ligase로 ligation하였다. 2. Transformation ligation...2025.01.22
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 예비보고서2025.01.041. DNA ligation DNA ligation은 DNA 단편을 연결하는 과정으로, 제한효소로 절단된 DNA 단편을 연결하여 재조합 DNA를 만드는 데 사용됩니다. 이 과정에서 DNA ligase 효소가 사용되며, 이를 통해 DNA 단편의 인접한 3' 수산기와 5' 인산기 사이의 공유 결합이 형성됩니다. DNA ligation은 유전자 클로닝, 유전자 조작, 유전체 연구 등 다양한 분자생물학 실험에서 중요한 기술입니다. 2. DNA transformation DNA transformation은 외부 DNA를 세포 내로 도입하는 ...2025.01.04
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[건국대학교] 의생명공학과 - 단백질공학 리포트(단백질조사)2025.01.151. Tissue Plasminogen Activator (tPA) Tissue Plasminogen Activator (tPA)는 혈중 plasminogen을 활성화하여 혈전을 용해시키는 plasmin으로 전환하는 과정을 촉진시키는 단백질(효소)입니다. Plasmin은 혈전을 분해하는 데 중요한 역할을 합니다. tPA는 주로 혈전성 질환 치료에 사용되는 혈전 용해제로, 혈관 내피세포에서 발견됩니다. 사람의 tPA는 약 70kDa의 분자량을 가지고 있습니다. tPA는 허혈성 뇌졸중, 급성 심근 경색, 급성 중증 폐동맥 색전증, 말초...2025.01.15
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[A+ 리포트] Ligation & Transformation (분자생물학실험)2025.04.251. Ligation 실험에서는 Vector와 PCR 산물을 Ligation하는 과정을 수행하였습니다. Ligation 시 주의사항으로는 T4 Ligase를 ice에 보관하며 가장 마지막에 첨가하고, 강한 충격을 피하는 것 등이 있습니다. 2. Transformation Transformation 과정에서는 Competent cell(E.coli)에 Ligation 산물을 처리하고 Heat-shock을 주었습니다. Competent cell은 온도에 매우 민감하므로 실험 중 ice 상태를 유지하는 것이 중요합니다. 실험 결과 일부 ...2025.04.25
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