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RNA 추출, cDNA 합성 및 qRT-PCR2025.01.181. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA의 상보적 가닥에 결합하는 2개의 프라이머를 동시에 사용하여 증폭을 원하는 DNA의 특정 영역만을 in vitro에서 복제, 증폭하는 기술이다. 3단계를 거쳐 DNA를 복제하는데, 변성, 결합, 신장 과정을 반복하여 DNA를 증폭시킨다. 2. RT-PCR (Reverse Transcriptase PCR) RT-PCR은 유전자에서 만들어진 RNA에서 역전사효소를 이용하여 cDNA를 생성한 후, cDNA를 주형 가닥으로 PCR을 수행하여, 유전자의 RNA 발현...2025.01.18
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RNA 분리 및 cDNA 합성, 실시간 PCR을 이용한 개화시기 측정2025.11.121. RNA 분리 (RNA Isolation) 생명과학 실험에서 세포나 조직으로부터 RNA를 추출하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 이 과정은 세포를 용해시키고 단백질과 DNA를 제거하여 순수한 RNA를 얻는 것을 목표로 합니다. 추출된 RNA는 이후 역전사 반응이나 유전자 발현 분석 등 다양한 실험의 기초 재료로 사용됩니다. 2. cDNA 합성 (cDNA Construction) mRNA를 주형으로 하여 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용해 상보적 DNA(complementary DNA)를 합성하는 과정입...2025.11.12
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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DNA 복제 기작2025.05.081. DNA 복제 기작 DNA 복제 기작은 DNA 복제 과정에서 일어나는 다양한 단계와 메커니즘을 설명합니다. 주요 내용으로는 반보존적 복제, DNA 복제에 필요한 효소들의 역할, 선도가닥과 지연가닥의 합성 과정, 오카자키 절편의 형성과 연결 등이 포함됩니다. 이를 통해 DNA가 정확하게 복제되는 과정을 이해할 수 있습니다. 1. DNA 복제 기작 DNA 복제 기작은 유전 정보를 자손에게 전달하는 핵심 과정입니다. DNA 이중 나선 구조가 분리되고 각 가닥이 주형으로 사용되어 새로운 DNA 가닥이 합성됩니다. 이 과정에는 DNA 중...2025.05.08
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Real-time PCR을 이용한 유전자 발현 분석2025.01.231. 전사(Transcription) 수준에서의 유전자 발현 분석 기법들 유전자 발현 분석 기법에는 Single gene analysis와 Whole genome analysis가 있다. Single gene analysis는 개별 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 Northern Blotting과 Real-time PCR이 있다. Whole genome analysis는 세포 내 전체 유전자의 발현량을 확인하는 실험 기법으로 RNA sequencing이 있다. 2. cDNA 합성에 사용될 수 있는 primer의 종류 cDN...2025.01.23
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DNA와 RNA의 구조, 염기 종류 및 기능 비교2025.05.041. DNA 구조 DNA는 2중의 긴 폴리뉴클레오타이드 사슬로 구성되어 있으며, 2개의 폴리뉴클레오타이드 가닥이 퓨린과 피리미딘의 염기 결합으로 2중 나선을 이룹니다. 구아닌 염기(퓨린)는 사이토신 염기(피리미딘)와 3중 수소결합을, 아데닌 염기(퓨린)는 티민 염기(피리미딘)와 2중 수소결합을 합니다. DNA는 히스톤 및 비히스톤 단백질과 결합하여 염주 모양의 뉴클레오솜을 형성합니다. 2. RNA 구조 RNA는 한 가닥의 폴리뉴클레오타이드 사슬로 구성되어 있으며, 당(리보스)은 인산과 이에스테르 결합으로 뉴클레오타이드를 연결하여 R...2025.05.04
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DNA와 RNA에서 사용되는 염기차이, DNA polymerase의 효소활성, 단백질 합성시 사용되는 ATP (에너지) 계산2025.05.081. DNA와 RNA의 염기 차이 DNA에서는 뉴클레오티드로 Thymine이 사용되고, RNA에서는 Uracil이 사용되는데, Thymine이 Uracil로부터 합성되는 경로와 왜 이렇게 구분되어 사용되는지 합리적인 이유를 설명하였다. Thymine과 Uracil의 구조적 차이, Cytosine의 Deamination 과정, Methylation에 의한 Thymine 합성 경로, Uracil의 Base pairing 가능성 등을 고려하여 DNA와 RNA에서 서로 다른 염기를 사용하는 이유를 분석하였다. 2. DNA 복제 과정의 Re...2025.05.08
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DNA 전사와 번역과정 구체적으로, <핵산의 정의, 구성성분, 전사, 번역,TRNA)2025.05.071. 뉴클레오티드 모든 생물의 세포 속에는 인산, 5탄당, 염기라는 물질로 구성된 핵산이 공통적으로 존재한다. 이 세 가지 각 한 분자의 물질이 연결되어 있는 것을 뉴클레오티드라고 부른다. 염기는 5종류(아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 우라실)이 존재하며 당은 인산과 염기를 연결시키는 역할을 한다. 또한 5탄당은 탄소원자가 5개 있는 탄수화물의 일종인데 줄여서 당이라고 이야기한다. 2. 리보오스와 디옥시리보오스 당은 리보오스와 디옥시리보오스로 구분된다. 5탄당이 디옥시리보오스이면 DNA(디옥시리보핵산)라고 하고 리보오스이면 RNA...2025.05.07
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DNA와 RNA 차이점 보고서, A+레포트2025.01.201. DNA와 RNA의 차이점 DNA와 RNA는 공통적으로 인산기, 오탄당, 염기로 구성되지만 오탄당의 종류와 염기의 종류에서 차이가 있다. DNA는 디옥시리보오스와 A, T, G, C 염기를 가지며, RNA는 리보오스와 A, U, G, C 염기를 가진다. DNA는 이중나선 구조이고 유전정보를 저장하는 역할을 하지만, RNA는 단일 사슬 구조이며 단백질 합성에 관여한다. 또한 DNA는 화학적 반응성이 낮고 안정성이 높지만, RNA는 화학적 반응성이 더 크고 변형되면 회복이 어렵다. 1. DNA와 RNA의 차이점 DNA(Deoxyri...2025.01.20
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[생물공정실험] 3주차 Gene expression analysis by RT-PCR 예비보고서2025.04.261. cDNA 정의 및 합성 방법 cDNA(complementary DNA)는 RNA를 주형으로 역전사효소와 DNA 중합효소에 의해 합성된 DNA입니다. 역전사효소를 이용한 cDNA 합성에서는 RNA와 annealing 위치에 따라 3종류의 primer를 사용할 수 있습니다. (1) 역전사 효소 (reverse transcriptase; RTase), (2) RT반응에 사용하는 primer (oligo dT primer, random primer, gene-specific primer). 2. Downstream applicatio...2025.04.26
