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생물공정실험 예비보고서 - P1 Transduction2025.01.041. Bacteriophage Bacteriophage는 세포 밖 또는 세포 안에 존재할 수 있으며, 세포 밖에서는 증식할 수 없기 때문에 비활성 상태이지만 세포 안에서는 숙주세포를 지휘하며 바이러스의 구성요소를 합성하고 자손 바이러스를 숙주 내부 물질을 이용해 조립한 후 숙주 세포 밖으로 방출한다. Bacteriophage는 정십이면체 형태의 비리온과 나선형 꼬리를 가지고 있어 이중대칭형(binal symmetry)이다. 2. 바이러스 생활사 바이러스는 크게 두 가지의 생활사를 갖는데, 용원성 생활사(Lysogenic cycle)...2025.01.04
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P1 박테리오파지를 이용한 형질도입 실험2025.11.111. 박테리오파지(Bacteriophage) 박테리오파지는 박테리아를 감염시키는 바이러스로, 단백질 구조로 둘러싸인 핵산 분자로 구성된다. 유전물질은 ssRNA, dsRNA, ssDNA, dsDNA 등이 원형 또는 선형으로 배열되어 있다. 박테리오파지는 머리와 꼬리로 구성되며, 약 96%는 숙주세포에 유전물질을 주입할 때 사용하는 꼬리를 가지고 있다. 독성파지와 온건성 파지로 구분되며, 용균성 생활사(lytic cycle)와 용원성 생활사(lysogenic cycle)를 거친다. 2. P1 박테리오파지 P1은 대장균과 일부 박테리아...2025.11.11
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P1 박테리오파지를 이용한 형질도입 실험2025.12.191. 박테리오파지(Bacteriophage) 박테리오파지는 세균을 숙주세포로 하여 특이적으로 결합하는 바이러스로, 인체에 독성을 나타내지 않습니다. 머리와 꼬리로 구성되어 있으며, 다각형 머리 내부에는 유전물질이 들어 있고 꼬리 부분은 숙주세포 내로 유전물질을 주입하는데 사용됩니다. 박테리오파지는 살아 있는 세포 내에서만 증식할 수 있으며, 숙주세포에 따라 종류가 매우 다양합니다. 표면에 자신의 몸통을 부착시킨 뒤 숙주세포 내부로 유전물질을 주입해 감염시킵니다. 2. P1 파지와 형질도입(P1 Phage and Transductio...2025.12.19
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[생물공정실험] 6주차 P1 Transduction 결과보고서2025.04.261. P1 Transduction 이번 실험에서는 P1 phage를 이용하여 recipient cell에 transduction하고 target 유전자가 삽입됐는지 colony 색으로 확인해보았다. E.Coli균의 사전 준비 과정은 조교님께서 대신 해주셨다. 이번 실험에서 recipient cell은 gadA gene이 knockout된 E.coliΔgadA이고, donor cell은 copA gene이 knockout되고 kanamycin 항생제에 대한 저항성을 가진 유전자가 삽입된 E.coliΔcopA::kan이다. 이를 통해 ...2025.04.26
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제한효소와 아가로즈젤 전기영동/ Restriction Digest and Agarose Gel Electrophoresis2025.01.121. Plasmid DNA Plasmid DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 vector를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 cell에는 plasmid DNA와 대장균 cell의 염색체 DNA인 chromosomal DNA가 독자적으로 존재하기 때문에 plasmid DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 일반적으로 Restriction enzymes를 처리하지 않은 plasmid DNA의 경우 ope...2025.01.12
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유전자와 유전자 활성 연구를 위한 분자도구2025.01.181. 서던블롯 서던블롯은 특정 DNA 절편을 동정하는 데 사용되는 기술입니다. 이 방법은 genomic DNA를 제한효소로 자른 후 아가로스 겔 전기영동을 통해 크기별로 분리합니다. 그리고 DNA를 변성시켜 nitrocellulose 또는 nylon 멤브레인으로 이동시킵니다. 이렇게 이동된 DNA는 방사선 동위원소나 비방사선 물질로 표지된 DNA 또는 RNA 탐침과 하이브리다이제이션되어 자기방사법 등을 통해 검출됩니다. 이 기술은 genomic DNA뿐만 아니라 plasmid, cosmid, bacteriophage 등의 분석에도 ...2025.01.18
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(SDS-PAGE, Coomassie Blue Staining)2025.01.231. SDS의 역할 및 원리 SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다. 2. PAGE의 원리 PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다. acrylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교...2025.01.23