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식물분자생물학실험 Histochemical GUS assay 결과보고서2025.01.181. GUS assay GUS assay는 Escherichia coli β-glucuronidase gene uidA (GUS)를 식물에서 reporter gene으로 활용하는 방법으로, 형광 측정, 분광 광도 측정 또는 조직화학적 기술을 통해 목적 유전자의 발현 위치를 확인할 수 있다. GUS assay는 높은 감도, 효소 안정성, 단순성으로 인해 자주 활용되며, 특히 histochemical staining을 통해 endogenous promoter activity를 관찰하는데 유용하다. 2. GUS 염색 원리 GUS assa...2025.01.18
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A+ 생화학실험 <12주차. Protein expression> 레포트2025.01.201. 발현 벡터 (pET vector) 발현 벡터(expression vector)는 분자 클로닝 결과로 얻은 재조합 DNA를 competent cell을 비롯한 다른 세포에 전달하는 데 사용한다. pET 벡터는 E. coli에서 재조합 단백질을 발현하기 위해 사용하는 대표적인 발현 벡터이다. pET 벡터는 플라스미드에 해당하나, 이 외에도 viral vector나 artificial chromosome 등이 발현 벡터로 사용될 수 있다. 발현 벡터의 역할을 하기 위해서는 세포 내에서 자가 복제가 가능해야 하며, 제한 효소에 의한 ...2025.01.20
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의대생의 분자생물학 chapter 26 요약본2025.01.181. RNA 대사 RNA는 대부분 단일가닥으로 기능하며, DNA보다 구조적 다양성이 크고 단백질과 합쳐서 기능하며 정보의 저장과 전달에 관여한다. ribozyme이라는 효소 활성도 갖는다. RNA의 종류에는 mRNA, rRNA, tRNA 등 3가지가 있다. 2. 전사(Transcription) 전사와 복제의 공통점은 initiation, elongation, termination 과정이 있고 주형이 필요하다는 것이다. 차이점은 전사에는 프라이머가 필요하지 않고 limited segment만을 포함한다는 것이다. DNA depende...2025.01.18
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대장균에서 재조합 단백질 생산 및 정제2025.01.131. 재조합 단백질 생산 대장균 BL21(DE3) 균주는 재조합 단백질 고발현에 널리 사용되며, lac 프로모터와 T7 프로모터를 이용하여 IPTG 유도 하에 단백질을 발현할 수 있다. 본 실험에서는 pET28a 벡터를 사용하여 His-tag 융합 단백질을 생산하고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피와 FPLC를 통해 단백질을 정제하는 방법을 익혔다. 2. 단백질 분석 SDS-PAGE를 통해 단백질 크기별 분리와 정제 과정을 확인하였고, Bradford assay로 단백질 농도를 정량하였다. 또한 DES와 OASS 효소 활성 측정을...2025.01.13
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DNA 전사와 번역과정 구체적으로, <핵산의 정의, 구성성분, 전사, 번역,TRNA)2025.05.071. 뉴클레오티드 모든 생물의 세포 속에는 인산, 5탄당, 염기라는 물질로 구성된 핵산이 공통적으로 존재한다. 이 세 가지 각 한 분자의 물질이 연결되어 있는 것을 뉴클레오티드라고 부른다. 염기는 5종류(아데닌, 구아닌, 티민, 시토신, 우라실)이 존재하며 당은 인산과 염기를 연결시키는 역할을 한다. 또한 5탄당은 탄소원자가 5개 있는 탄수화물의 일종인데 줄여서 당이라고 이야기한다. 2. 리보오스와 디옥시리보오스 당은 리보오스와 디옥시리보오스로 구분된다. 5탄당이 디옥시리보오스이면 DNA(디옥시리보핵산)라고 하고 리보오스이면 RNA...2025.05.07
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기업의 사회적 책임(CSR)에 대한 이해와 실제 사례2025.04.301. CSR의 개념 CSR은 기업의 경제적 또는 법적 책임 외에도 더 넓은 사회적 책임을 적극적으로 수행해야 한다는 의미입니다. 이는 제품 생산 과정에서의 환경 보호, 윤리적 경영, 인권 존중, 제품 결함에 대한 보상, 국가와 지역사회에 대한 공헌 등을 포함합니다. ISO26000 국제 표준이 CSR의 평가 기준을 제시하고 있으며, Caroll은 CSR을 자선적, 윤리적, 법적, 경제적 책임의 4가지 영역으로 나누었습니다. 2. CSR의 필요성 CSR은 단순한 윤리적 책임을 넘어 노동자, 소비자, 지역사회 등 다양한 이해관계자의 이...2025.04.30
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GUS staining 실험 분석 및 결과 해석2025.11.121. GUS staining (β-glucuronidase staining) GUS staining은 식물 생명과학 실험에서 유전자 발현을 시각화하는 기법입니다. β-glucuronidase 효소가 X-Gluc 기질과 반응하여 파란색 침전물을 생성하므로, 특정 유전자가 발현되는 조직과 세포를 정확하게 관찰할 수 있습니다. 이 방법은 식물의 발달 과정, 호르몬 반응, 환경 스트레스 반응 등을 연구하는 데 널리 사용됩니다. 2. 유전자 발현 분석 (Gene Expression Analysis) GUS staining을 통해 식물 조직에...2025.11.12
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Lewin's Essential GENES 분자생물학 4판 정리노트 08. 크로마틴2025.05.101. 크로마틴 크로마틴은 히스톤에 의해 매개되어 응축된 형태이며, 뉴클레오좀이 크로마틴의 기본 단위이다. 뉴클레오좀은 히스톤 옥타머에 DNA가 감겨있는 구조로, 다양한 공유 결합 변형을 통해 크로마틴의 구조와 기능이 조절된다. 히스톤 변이체와 DNA 구조 변화도 크로마틴 구조에 영향을 미치며, 뉴클레오좀 배열은 유전자 발현 조절에 중요한 역할을 한다. 2. 뉴클레오좀 뉴클레오좀은 크로마틴의 기본 단위로, 히스톤 옥타머에 DNA가 감겨있는 구조이다. 뉴클레오좀은 MNase 처리를 통해 얻을 수 있으며, 히스톤 변이체와 다양한 공유 결...2025.05.10
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Cerberus protein이 발생에 미치는 영향 레포트_발생학2025.01.201. Cerberus protein의 역할 Cerberus(CER1)는 배아의 낭배 단계에서 분비되는 TGF β signaling pathway를 억제하는 중요한 signal protein이다. CER1 gene은 앞뒤축과 좌우축의 패턴 형성에 관여하며, 머리 형성을 유도하는 기능을 갖고 있다. Cerberus는 BMP4, Xnr1, Xwnt8을 억제함으로써 머리 형성을 유도한다. 또한 Cerberus는 Nodal signaling molecule에 의해 활성화되어 심장 분화와 발달에 중요한 역할을 한다. 2. Cerberus의 발...2025.01.20
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SDS-PAGE2025.01.121. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분리하는 기술로, 전기영동 이동성을 이용한다. 단백질은 SDS 처리를 통해 균일하게 음전하를 띠게 되어 분자량에 따라 분리될 수 있다. 이 실험에서는 단백질 발현에 IPTG의 영향을 확인하고자 하였으나 이전 실험 결과의 불확실성으로 인해 IPTG의 영향을 명확히 알기 어려웠다. 단백질 염색 결과를 통해 약 45 kDa 크기의 단백질이 분리된 것을 확인할 수 있었다. 2. Discontinuous Buffer System Discontinuous buffer system은 stackin...2025.01.12
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