엘라이자 항체검사 실험 보고서

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문서 내 토픽

• 1. ELISA (효소면역정량법)

  ELISA는 biochemistry assay 분야에서 가장 흔히 이용되는 검사방법으로, ligand 역할을 하는 antigen이나 antibody를 감지하고 정량화할 수 있다. 의료 분야에서는 진단에, 연구 분야에서는 단백질 양 정량화에 이용된다. Direct ELISA, Indirect ELISA, Sandwich ELISA, Competitive ELISA 등 4가지 종류로 나뉘며, 각각의 방식은 특정 목적과 장단점을 가지고 있다. 본 실험에서는 competitive sandwich antibody ELISA 방식을 이용하여 A형 인플루엔자 항체를 검사했다.

• 2. A형 인플루엔자 항체 검사

  바이오노트 사의 A-type Influenza antibody ELISA kit를 이용하여 닭 혈청 샘플 5개에 대해 A형 avian influenza 감염 여부를 확인했다. NP antigen에 대한 항체 존재 여부를 통해 감염 이력을 판정했다. PI value 기준값(닭의 경우 50)을 기준으로 양성/음성을 판정하며, sample 1, 2, 3은 양성(PI value 99.11, 96.52, 78.74), sample 5-1, 6-1은 음성(PI value 0)으로 판정되었다.

• 3. ELISA 실험 절차 및 방법

  인플루엔자 NP antigen이 부착된 ELISA plate의 각 well에 음성/양성 대조액과 샘플 혈청 50ul를 분주한 후 접합체액을 첨가했다. 37℃에서 30분 반응시킨 후 6회 세척하고, TMB 기질액을 첨가하여 10분 반응시켰다. 반응정지액을 넣은 후 450nm와 620nm 파장에서 흡광도를 측정했다. PI value는 [1-(샘플 흡광도/음성 대조액 평균 흡광도)]×100 공식으로 계산되었다.

• 4. 검체 준비 및 품질 관리

  검체는 혈청 또는 혈장을 사용하며, 심각한 용혈이나 미생물 오염된 샘플은 사용할 수 없다. 2~8℃에서 15일, 3일 이상 보관 시 -20℃에서 보관해야 한다. 음성 대조액은 3개 well에서 평균 흡광도 1.0 이상, 양성 대조액은 2개 well에서 -0.005~0.500 범위 내에서 나타나야 정상 실험으로 판정된다.

Easy AI와 토픽 톺아보기

• 1. ELISA (효소면역정량법)

  ELISA는 현대 진단 검사의 핵심 기술로서 높은 특이성과 민감도를 제공합니다. 이 방법은 항원-항체 반응을 효소 반응과 결합하여 정량적 결과를 도출하므로 임상 진단에서 매우 신뢰할 수 있습니다. 다양한 질병의 진단, 약물 농도 측정, 호르몬 검사 등 광범위한 응용이 가능하며, 상대적으로 비용 효율적이고 자동화가 용이하다는 장점이 있습니다. 다만 정확한 결과를 위해서는 엄격한 표준화와 품질 관리가 필수적이며, 숙련된 기술자의 역할이 중요합니다.

• 2. A형 인플루엔자 항체 검사

  A형 인플루엔자 항체 검사는 감염 여부를 확인하고 면역 상태를 평가하는 데 중요한 역할을 합니다. ELISA를 통한 항체 검사는 바이러스 배양이나 PCR보다 빠르고 경제적이며, 대규모 선별 검사에 적합합니다. 특히 IgM 항체는 급성 감염을, IgG 항체는 과거 감염이나 백신 접종 후 면역력을 나타내므로 임상적 의미가 큽니다. 다만 교차 반응성과 위음성 가능성을 고려하여 임상 증상과 함께 종합적으로 판단해야 합니다.

• 3. ELISA 실험 절차 및 방법

  ELISA 실험 절차는 정확한 결과를 위해 각 단계가 매우 중요합니다. 마이크로플레이트 코팅, 차단, 검체 및 항체 첨가, 세척, 효소 반응 등의 과정이 표준화되어야 하며, 온도, 시간, 농도 등의 조건을 엄격히 관리해야 합니다. 자동화 장비의 사용은 재현성을 높이고 인적 오류를 줄일 수 있습니다. 또한 양성 및 음성 대조군의 적절한 설정과 결과 해석 기준의 명확한 설정이 필수적이며, 정기적인 검증과 품질 관리가 지속되어야 합니다.

• 4. 검체 준비 및 품질 관리

  검체 준비는 ELISA 결과의 신뢰성을 좌우하는 가장 기초적이면서도 중요한 단계입니다. 적절한 채혈 용기 선택, 정확한 채혈 기술, 신속한 운송 및 보관이 필수적이며, 용혈, 지질혈증, 황달 등의 간섭 물질을 최소화해야 합니다. 검체의 동결-해동 횟수 제한, 적절한 보관 온도 유지, 검체 추적 관리 시스템의 구축이 중요합니다. 품질 관리를 위해 정기적인 내부 정도 관리와 외부 정도 관리 프로그램 참여가 필수적이며, 이를 통해 검사의 정확성과 신뢰성을 보장할 수 있습니다.