[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] ELISA

문서 내 토픽

1. ELISA

ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA, sandwich ELISA 등 다양한 방식이 존재한다.
2. Direct ELISA

Direct ELISA는 primary antibody만을 통해 antigen을 직접 검출하는 방식이다. 우선 well에 antigen을 coating 하여 바닥에 고정한 뒤, 해당 antigen에 대한 antibody를 투여하여 coating 된 antigen과 결합하도록 한다. 이후 antigen과 결합하지 않은 antibody를 wash 하고, antibody에 conjugation 된 enzyme과 반응하는 substrate를 넣어 반응을 일으킨다. 해당 반응이 일어나는 정도를 통해 antigen 혹은 antibody의 양을 측정할 수 있다.

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1. ELISA

ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 항원-항체 반응을 이용하여 특정 물질의 존재 여부와 농도를 측정하는 대표적인 면역학적 분석 기법입니다. ELISA는 민감도와 특이성이 높아 다양한 분야에서 널리 사용되고 있습니다. 특히 감염성 질병 진단, 약물 모니터링, 환경 오염 물질 검출 등에 활용되고 있습니다. ELISA는 간단한 실험 과정과 장비로 수행할 수 있어 비용 효율적이며, 정량적인 결과를 제공할 수 있다는 장점이 있습니다. 그러나 ELISA는 항체의 특이성에 따라 결과의 신뢰성이 달라질 수 있으며, 복잡한 시료에서는 간섭 효과로 인해 정확도가 떨어질 수 있습니다. 따라서 ELISA 실험 시 적절한 시료 전처리와 표준화된 프로토콜 사용이 중요합니다.
2. Direct ELISA

Direct ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 ELISA 기법 중 가장 기본적이고 간단한 형태의 면역분석법입니다. Direct ELISA에서는 항원이 고정된 고체 지지체에 직접 항체-효소 접합체를 결합시켜 검출하는 방식을 사용합니다. 이 방식은 항원과 항체 간의 특이적 결합을 직접 관찰할 수 있어 신속하고 간단한 분석이 가능합니다. 또한 시료 전처리가 간단하고 실험 과정이 짧아 시간과 비용이 절감됩니다. 그러나 Direct ELISA는 간섭 물질에 의한 영향을 많이 받으며, 검출 감도가 상대적으로 낮다는 단점이 있습니다. 따라서 복잡한 시료나 낮은 농도의 분석물질 검출에는 적합하지 않습니다. 이러한 한계를 극복하기 위해 간접 ELISA, 샌드위치 ELISA 등 다양한 변형된 ELISA 기법이 개발되었습니다.