소개글
"일반생물학실험 플라스미드 DNA 추출"에 대한 내용입니다.
목차
1. 플라스미드 DNA 추출
1.1. 실험 목적
1.2. 실험 이론 및 원리
1.2.1. DNA Mini prep
1.2.2. Plasmid DNA
1.2.3. Plasmid DNA 분리 정제
1.2.3.1. CsCl/EtBr Equilibrium Centrifugation
1.2.3.2. Boiling method
1.2.3.3. Alkaline lysis method
1.3. 실험 기구 및 시약
1.4. 실험 방법
1.5. 실험 결과 및 토의
1.5.1. 실험 고찰
2. 참고 문헌
본문내용
1. 플라스미드 DNA 추출
1.1. 실험 목적
이 실험의 목적은 대장균으로부터 Recombinant DNA plasmid를 직접 추출하여 분자생물학적 실험의 기본이 되는 DNA 관련 실험에 대해 이해하는 것이다"
1.2. 실험 이론 및 원리
1.2.1. DNA Mini prep
DNA Mini prep은 소량의 DNA를 추출하는 방법이다. DNA Mini prep이란 말을 쓰는데 "prep"은 "preparation"의 줄임말로 DNA를 소량으로 추출한다는 의미이다. 이는 주로 플라스미드 DNA를 추출하는데 사용되는 방법이다.
플라스미드 DNA는 세균 세포 내에 염색체와 별도로 존재하는 작은 원형 이중나선 DNA 분자이다. 플라스미드는 일반적으로 세균의 생장이나 생존에 필수적이지 않지만, 몇몇 플라스미드에는 항생제 내성 유전자 등 유용한 유전자가 존재한다. 따라서 이러한 플라스미드 DNA를 추출하여 분자생물학 실험에 활용할 수 있다.
DNA Mini prep 방법에는 Boiling method와 Alkaline lysis method 등이 있는데, 그 중 Alkaline lysis method가 가장 널리 사용되는 방법이다. Alkaline lysis method는 플라스미드 DNA를 염색체 DNA로부터 분리하는 구조적 기본 원리에 따른 방법이다. 이 방법은 순도 높은 플라스미드 DNA를 얻을 수 있고, 실험 시간도 오래 걸리지 않아 매우 효율적이다.
1.2.2. Plasmid DNA
플라스미드 DNA는 세균과 같은 원핵생물의 세포 내 염색체와 별개로 독립적으로 존재하는 원형의 이중나선 DNA 분자이다. 일반적으로 플라스미드는 세균의 생장이나 생존에 필수적이지는 않다.
플라스미드는 일반적으로 몇 가지 특성을 가지고 있다. 첫째, 플라스미드는 염색체보다 작으며 복제개시점을 갖고 있기 때문에 염색체와는 독립적으로 복제할 수 있다. 둘째, 플라스미드가 갖고 있는 몇몇 유전자는 세균과 같은 숙주세포의 특성의 영향을 줄 수 있다. 예로 P-플라스미드는 페니실린을 포함한 여러 항생제에 대한 내성을 갖게 하는 유전자를 가지고 있어 P-플라스미드를 가진 Pseudomonas라는 세균 또한 여러 항생제에 대한 내성을 가지게 된다.
플라스미드는 기능에 따라 다양한 종류가 존재하며 크게는 플라스미드 자신이 한 세균에서 다른 세균으로 이동할 수 있는 전이성을 갖는 접합성 플라...
참고 자료
알기 쉽고 재미있는 분자생물학 4판. n.p.: (주)라이프 사이언스. David P. Clark, Lonnie D. Russell. 2013.
Purves, Life The Science of Biology, 7th Edition, Freeman, 2007, p.312-313
Campbell, Biology, 8th Edition, Pearson, 2008, p. 399
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