단백질 정제법

소개

2. 단백질 용해 과정
정제하고자 하는 단백질들은 대부분 동물 장기나 조직 그리고 세포안에 가두어진 상태이기 때문에 이들을 용해시키는 과정이 필요하다. 용해 과정은 아래와 같은 방법들이 있다.
➀ Osmotic lysis
: 이 경우는 세균과 식물세포 그리고 곰팡이 등에는 이용할 수 없는 방법이지만 선택적으로 동물세포에서 사용 할 수 있다. 용액 중에 다른 세포들과 함께 있는 RBC만를 용혈시키는 방법으로 0.83% ammonium chloride 용액을 사용하여 hypotonic한 상태로 한 후 피펫을 이용하여 3분간 왕복을 하면 주로 RBC만 용혈된다. 이 방법은 세포나 단백질에 피해가 적은 방법들 중의 하나이다.
➁ Ultrasonic waves
: 세균이나 효모등을 분쇄하는 데 많이 사용하는 방법으로 이 경우 많은 양의 열을 발산할 수 있으므로 얼음 상자를 준비하여 시료의 온도가 올라가지 않도록 하는 것이 중요하다.
➂ Grinding
: Mortar와 pestle을 이용하여 냉동 건조된 조직이나 액체 질소로 얼린 조직을 분쇄하여 완충액을 첨가하는 방법으로 암 조직과 같이 결제조직이 많은 조직과 장기에 이용할 수 있는 방법이다.

목차

Ⅰ. 서론
Ⅱ. 본론
1. 단백질 정제의 고려사항
2. 단백질 용해과정
3. 단백질 안정화
4. 단백질 정제기술
1) 염석 및 유기용매에 의한 침전
2) 투석
3) 크로마토그래피
4) 전기영동
5) 원심분리
Ⅲ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 서론
단백질은 매우 중요한 생물의 화학적 성분으로 물질의 운반, 이물질로 부터의 방어, 효소,대사, 생체의 형태유지 등 다양한 생물학적 기능을 한다. 단백질들은 20여종의 아미노산으로 구성되어있지만 각 세포는 다양한 구조를 가지고 있다. 단백질을 단백질의 3차 구조에 따라 구형을 이루는 구형단백질과 섬유형을 하고 있는 섬유상 단백질로 나뉠 수 있다. 구형 단백질들은 헤모글로빈이나 사이토크롬 c와 같이 비교적 물에 잘 녹는 성질을 가지고 있으나, 섬유상 단백질들은 물에 잘 녹지 않으며, 결체조직이나 근육 등의 구조물을 이루고 있다. 따라서 세포나 동물들이 생명을 유지하기 위해서는 다양한 단백질들이 모여 조화를 이루어야 건강함을 유지할 수 있다.
이렇게 우리 몸에서 중요한 역할을 하고 있는 단백질의 구조와 기능을 이해한다면 생명현상을 이해할 수 있게 될 것이다. 그러나 단백질은 모두 혼재된 상태로 존재하기 때문에 이들 각각의 구조와 기능을 연구하기 위해서는 우선적으로 연구하고자 하는 단백질을 정제해야만 한다. 그러기 위해서는 몇 가지의 기술을 이용해야만 한다. 그 필요한 방법은, 생화학 그 자체만큼이나 오랫동안 생화학의 중심적인 위치를 차지했던 학술분야인 단백질 화학으로부터 유래된다.
단백질을 정제하기 위해선 식물, 동물, 미생물 등의 조직, 세포 중의 단백질을 용액 중에 추출해야 한다. 조직이나 세포를 기계적인 힘으로 파쇄하여 단백질을 완충액 중으로 추출하는 경우가 많으며 세포 잔사는 원심분리하여 제거하고 상등액 중의 단백질 혼합물은 다음 정제 단계로 넘긴다. 어떤 종류의 단백질은 세포막회분에 강하게 결합하고 있어 이것을 가용화하기 위해서는 여러 가지 계면활성제를 사용하거나 유기용매로 막 구분을 녹여서 추출하는 경우도 있다.
이러한 단백질 정제법은 여러 생명현상을 이해 할 수 있게 할 뿐만 아니라, 미생물학, 분자생물학, 화학과 같은 여러 과학 분야의 연구, proteomics, drug 발견과 생산에 매우 중요한 일이다. 백질 분리는 이런 모든 분야에서 반드시 sample preparation, protein

참고자료

· http://www.accessexcellence.org/LC/SS/chromatography_background.php
· http://en.wikipedia.org/wiki/Chromatography#History
· 생화학, 김명순·김종화 외 11인, 형설출판사, 1999.
· 생화학 (상), 채범석 역, 서울외국서적, 1996
· http://myungsung.net/board/way-board
· http://blog.naver.com/hwanzzang
· 화학공학포럼 http://www.cheric.org/board/view
· 화학공학 livery http://blog.naver.com/etty0915