DNA 농도 측정 및 크기 분류

소개

DNA 농도 측정 및 크기 분류

목차

Introduction & Theory
1. DNA concentration measurement
2. Restriction enzyme digest of DNA and agarose gel electrophoresis

Data & Result

DISCUSSION

본문내용

Introduction & Theory
1. DNA concentration measurement
DNA는 260nm 파장에서 최고의 흡광도를 보이며, 1 A260 Unit가 ds-DNA는 50ug/ ml,
ss-DNA는 33ug/ul, ss-RNA는 40ug/ml, oligomer는 25∼35ug/ml의 농도를 나타낸다. 유사파장에서 간섭이 가능한 물질로는 단백질, phenol 등이 있는데 이들은 UV 범위내 280nm에서 최고 흡광도를 보인다. 간섭물질이 없을 때의 순수한 ds-DNA는 A260/A280 (흡광도)비가 1.7이며 ss-DNA, RNA는 1.8이상의 값을 보인다. 이것의 비로서, 단백질이나 다른 물질의 오염여부를, 즉 DNA의 순도를 예측할 수 있다. 샘플의 A260/A280 의 값이 1.8보다 높다면 순수하다고 볼 수 있다.
DNA sample의 농도는 DNA의 농도가 50㎍/㎖일 때에 A260의 값이 1.0 임을 이용해 다음과 같은 공식을 얻을 수 있다.


2. Restriction enzyme digest of DNA and agarose gel electrophoresis
DNA에 포함 되어 있는 인산기로 인해 - 전하를 띄고 있다는 점을 이용해 agarose gel에 + 와 - 전하를 걸어주어 + 전하에 끌려오게 하는데 DNA의 분자 모양, 크기에 따라 agarose에 의한 저항력이 다르기 때문에 거리의 차이가 생김을 이용해 DNA의 분자량을 예측 할 수 있는 방법이다.

참고자료

· 없음