칼럼 크로마토그래피와 단백질 정제

소개

단백질을 정제하기 위한 칼럼 크로마토그래피의 종류와 특징에 관해 조사한 리포트입니다.

목차

1. 칼럼 크로마토그래피란?
2. 칼럼 크로마토그래피의 개요
3. 칼럼 크로마토그래피의 종류
4. 실험 및 설계
5. 참고문헌

본문내용

Protein purification with column chromatography

세포는 수천 가지의 다른 단백질들을 포함하고 있으므로, 한 가지 단백질을 분리하여 그 단백질의 구조를 결정하는 작업은 극히 어렵다. 단백질을 정제하고 그 특성을 규명하는 기술은 여러 가지가 있는데, 그 기술에는 분자량, 등전점, 소단위체의 개수와 같은 물리적 성질을 결정하는 것으로부터 구성 아미노산의 개수와 종류를 알아내고 완전한 아미노산 서열을 밝히는 것까지 다양하다. 단백질이 그 구성 아미노산으로 분해되면, 그 아미노산들을 전하와 극성에 따라 크로마토그래피에 의해 확인 할 수 있다. 단백질 말단에 있는 아미노산은 화학적으로 표지시켜서 확인할 수 있다. 전체 사슬ㅇ르 특이적으로 절단하여 분해하면 연관된 펩타이드 조각들을 얻을 수 있다. 각 펩타이드들을 한 번에 한 아미노산씩 잘라내어 그 서열을 밝힐 수 있다. 구조 결정의 마지막 단계에는 완전한 단백질 전체를 X선 회절 분석법으로 분석하여 3차원 구조를 결정하면 된다. 그러나 단백질을 우선 칼럼 크로마토그래피나 전기영동 등의 방법으로 정제한 후 결정화해야 된다.

1. 칼럼 크로마토그래피란?
일반적으로 화학분석에 쓰이는 방법은 우선 선택성이 있어야 한다. 선택성이 있다고 하여도 정말로 선택적인 것은 얼마 되지 않는다. 다라서 중요한 방해물로부터 분석물을 분리하는 것이 많은 분석과정에서 중요한 단계가 된다. 의심할 여지가 없이 분석적 분리를 하는 데 가장 널리 쓰이는 방법이 크로마토그래피법이고 모든 과학 분야에서 널리 이용되고 있다.

참고자료

· ● 기기분석 / 함동곤 외 공저 / 창문각 / 335~342page
· ● 기기분석의 원리 / Skoog, Leary / 탐구당 / 673~676, 729~744page
· ● 생화학 / Mary K. Cambell, Shawn O. Farrell / 라이프 사이언스 /
· 110~120page
· ● protein purification principle and practice / Rovert K. Scope / Springer -Verlag / 8~14page