Exp 5. Measurement of Catalse Activity

소개

카탈라아제의 활성측정 실험입니다.

목차

Introduction
효소활성측정법
효소의 특이성
카탈라아제(Catalse)
Result

본문내용

Introduction
효소활성측정법
1. 효소
효소란 대부분이 구형 단백질 분자로써 화학적 촉매와 같이 반응물질의 활성화 에너지를 낮추어 반응속도를 촉진시킬 뿐 자신은 화학반응에 관여하지 않는다.
2. 효소활성측정
일정한 온도와 일정한 pH하에서 일정량의 기질과 효소를 반응시켜, 감소된 반응물질의 양 또는 생성된 생산물질의 양을 일정시간 간격으로 측정하는 것으로 효소의 농도를 일정하게 하고 기질의 농도를 변화시켜가면서 반응속도 측정.
3. 효소농도에 따른 효소의 반응속도
기질의 농도 S가 낮을 때 효소 반응속도는 S에 비례하므로 대단히 빠르나, 기질의 농도가 충분히 커지면 반응속도의 증가가 없는 포화상태가 되어 최대속도 Vmax에 도달한다.
효소에 의해서 촉매되는 반응들의 초기속도 는 기질의 농도가 증가함에 따라서 증가하다가 기질의 농도가 더 증가하여도 초기속도가 더이상 증가하지 않는다. 이와 같은 현상과 기질포화에 도달하였을 때의 최대초기속도(Vmax)는 다음과 같이 나타낼 수 있으며 이 반응은 중간물질인 효소기질 복합체가 형성되어야만 일어나고 모든 효소분자가 복합체를 이루고 있을 경우에 관찰되는 속도가 최대속도이다.

4. 효소의 작용
효소(E)와 기질(S)이 결합하여 효소-기질복합체(ES)를 형성하며, 이 복합체는 대단히 안정하고 활정화 에너지가 작으므로, 곧 내부 분자구조가 변형되어 반응 생성물과 효소로 분리된다.
5. 효소의 단위
효소활성은 지정된 조건하에서 1분동안 1umol의 기질의 변화를 촉매하는 효소량과 같다. (일반적으로 사용되는 단위 = 효소바다 기질이 다르기 때문에 약간의 차이가 있다.
6. 효소활성에 영향을 미치는 요인
ⓛ온도
• 45℃까지는 온도의 상승에 따라 반응속도가 증가한다.
• 45℃ 이후에는 열변성이 시작된다. (단백질로 구성되어 있기 때문에)
• 55℃ 이상이면 변성을 일으켜서 촉매를 잃게 된다.
• 효소최대 반응속도 온도는 35℃에서 45℃이다.

참고자료

· ⓛ 생화학/김향 외/문은당/2003/p117
· ② 식물생리학/권영명외 13인/도서출판 아카데미/1997년/pp110~112