Exp.13. Electrophoresis of DNA

소개

DNA를 전기영동한 실험입니다. 전기영동한 후 결과를 직접 사진으로 찍어
첨부하였습니다.

목차

Introduction
전기영동의 이론
전기영동의 주요 분류
아가로오스 겔 전기영동시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들
Result
Discussion
Reference

본문내용

Introduction
전기영동은 주로 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들을 분석, 분리, 정제하는 중요한 방법중에 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 같은 것들이 고유의 전하를 띠고 있고, 그것들이 어떤 전기장에 놓이게 되면 이동할 수 있다는 사실을 기본으로 하고 있다. 이러한 물질들의 이동 정도는 각 물질의 크기나 모양 그리고 전하에 따라 달라진다. 즉, 크기가 큰 물질들은 크기가 작은 물질보다 더 천천히 겔을 통과하기 때문에 크기에 따라 물질들이 분리된다. 초기의 전기영동은 sucrose 용액같은 액체 상태에서 수행되었지만 점차로 발전하여 종이, 셀룰로오스 아세테이트 막, 전분 겔 전기영동 등을 사용하다가, 현재까지도 널리 쓰이는 아가로오스와 아크릴아마이드를 이용한 겔, 원판형(disk) 겔, 면역체전기영동(immunoelectrophoresis) 등을 거쳐 isoelectric focusing 뿐만 아니라 2차원(two-dimensional) 전기영동까지 발전하였다. 아크릴아마이드는 크기가 작은 물질을 높은 해상도로 구분할 수 있는 장점이 있고, 아가로오스는 해상도는 낮지만 아주 넓은 범위 (200bp ~ 50Kb)의 DNA나 RNA시료를 분리할 수 있다는 장점이 있다.

전기영동의 이론
완충용액 속에서 거대분자들은 전하를 띠게 된다. 또한 이 분자들의 전하는 그 완충용액 pH에 따라 달라지는데, 전기영동에서는 전체전하가 중요한 역할을 한다. 왜냐하면 일정한 전기장 안에서 각 분자의 전체 전하나 크기에 따라 이동하는 속도가 달라짐으로 인해 물질의 분리가 일어나기 때문이다. 만약 어떤 전기장에서 분자의 전체전하를 q라 하면, 힘 F는 분자의 전하와 전기장의 강도에 따라 작용된다. 이를 수식으로 나타내면

참고자료

· 1. 정해영, 신분자유전학, 2001, 신일상사, p211~213
· 2. 황혜진 외 4명, Essentials of 유전학, 1997, 월드사이언스, p43, p77~80
· 3. 이동호 외, 임상분자생물학, 2000, p131~133