동물생리학 척추,뇌조직 고정,염색 cryo stat

소개

동물생리학실험중 조직 섹션 방법중 cryo stat방법입니다.

목차

Introduction
조직표본의 제작
1. 고정(fixation)
2. 수세 (washing)
3. 포매 (embedding)
4. 박절 (sectioning)
5. 염색 (staining)
Reference

본문내용

Introduction
조직표본의 제작
조직의 미세한 구조를 이해하려면 세포나 조직을 살아 있는 상태에 가까운 것을 관찰할 필요가 있다. 그러나 살아 있는 상태의 것을 관찰하는 방법에는 한계가 있기 때문에 일반적으로 조직을 고정한 후 적당한 겔(gel)중에 포매하고 일정한 두께의 얇은 절편을 만들어 염색하는 이른바 조직표본을 제작한다.
1. 고정(fixation)
고정의 목적
생조직의 활동을 신속히 차단하여 구성요소들이 용해되지 않음으로서 염색성을 갖도록 하는데 고정의 목적이 있다. 일반적으로 조직을 고정액중에 넣으면 구성단백질의 변성과 응고로 말미암아 형태와 생물학적 활동의 정지가 일어난다. 따라서 좋은 고정이라 함은 가능한한 조직의 변형없이 살아 있는 상태의 구조를 그대로 고정하는 것이다.
고정의 요점
ⓛ신선한 상태의 조직으로부터 목적하는 부분을 예리한 메스나 안전 면도날로 신속히 적출하여 고정액중에 넣어야 한다. 적출시 조직에 압박을 가하거나 손상을 입혀서도 안된다.
②조직편의 약 20～30배 정도의 투명한 고정액을 사용하는 것이 좋다.
③가능하다면 고정액이 잘 침투되도록 조직편을 작게 잘라 고정하며 자주 고정액을 교환하는 것이 좋다. Formalin중에서는 보통 3～12시간 정도 고정한다.
④크기가 큰 조직편(장기 등)은 혈관내로 고정액을 주입하는 관류고정(perfusion fixation)방법을 쓰기도 한다.
⑤일반적으로 복합형의 고정액을 쓰면 고정액의 침투성이나 염색성이 양호하다.

참고자료

· 조직학. 고정식 외. 고문사, 1997. pp2~13, pp15~20
· 박경아 외, 조직학 실습(3), 고려의학, 2001, pp.6~40