[전기영동] SDS-PAGE (단백질 분자량 측정)

소개

standard protein 용액을 통해 미지의 단백질 분자량을 결정한다

목차

I. 실험 목적
II. 실험 원리
A. 이론
B. 원리
III. 실험 재료, 시약 및 기구
IV. 실험 방법
V. 실험 결과 및 고찰
A. 결과
B. 고찰
VI. 참고문헌


- 그림 차례 -
[그림 1] 약염기성 전리기와 약산성 전리기 모두 전리도가 크게 변하는 것은
pK±2의 pH에서, pH=pK에서 전리도는 50% (α=0.5) 이다.
[그림 2] Amino acid, 단백질의 전하와 pH의 관계를 각각의 분자에 있는 기의 전리도가
[그림 1]에서 주어진 대로 계산된 예
[그림 3] SDS의 구조
[그림 4] 2-Mercaptoethanol의 구조
[그림 5] 전기영동중의 단백조
[그림 6] Gel의 농도(%T)와 marker 단백질의 이동도
[그림 7] Marker와 단백질의 분자량과 이동도
[그림 8] 전기영동 결과 사진
[그림 9] 결과로 본 단백질 분자량에 따른 이동 거리

본문내용

I. I. I. 실험 목적
전하를 띤 입자가 움직일 때 분자량이 큰 것은 비교적 적게, 분자량이 작은 것은 비교적 많이 이동하는 성질을 이용하여 standard protein 용액을 통해 미지의 단백질 분자량을 결정한다(실험일: 2008년 3월 31일 월요일, 4월 7일 월요일).


II. 실험 원리
A. 이론
1. 전기영동이란?
전기영동은 전장 내에서 전하를 띤 입자들의 움직임이다. 용액에 전압을 걸면 이동)을 전기영동이라고 한다.
전압의 차이가 용액에 함유된 ion 등의 전기를 띤 입자가 움직이는 것(음전하를 띤 입자는 양극(anode)을 향해 이동하고 양전하를 띤 입자는 음극(cathode)으로 전기영동의 임상적인 응용은 주로 단백질이나 단백질과 연관된 물질 EH는 유사한 성질을 가진 물질이 대상이 된다. 단백질은 그 1차 구조가 amino acid로 구성되어 양극성(amphoteric)을 나타낸다. 따라서 단백질은 전하를 띨 수 있는 2개의 말단인 acetic carboxyl group과 basic amino group을 가지고 있다.

단백질의 1차 구조는 하나의 amino acid에 있는 acetic carboxyl기와 다른 amino acid의 basic amino기에서 하나의 물 분자가 빠지면 서로 peptide 결합을 하여 긴 사슬로 연결된 polypeptides, polypeptide chain을 형성한다. 같은 수의 양전하와 음전하를 가지고 있는 단백질의 순전하(net charge)는 전기적으로 중성이므로 이런 단백질 입자는 전장에서 움직이지 않는다. 단백질의 하전은 그 결합에 관여하는 α-carboxyl기와 α-amino기는 관계가 없으며 amino acid의 carboxyl기와 amino기가 주요 원인이 되는 것이다. Amino acid의 amino기는 용매 중의 물과 반응하여 alkali성을 띠며 carboxyl기는 해리되어 산성을 띠게 된다. 즉, 아래의 반응식으로 나타난다.

참고자료

· 식품분석실험, 광문각, 조형용 외, 2003년
· 전기영동, 의학문화사, 권오헌과 이귀녕, 2002년