[영양판정 및 실험] 빈혈측정, 헤모글로빈 농도 측정, RBC count, Hematocrit(헤마토그릿)측정

소개

- 실험목적, 원리, 방법이 빠짐없이 기록되었습니다.
- 결과분석, 고찰의 분량이 길고 자세합니다.
- 사진이 많이 첨부되었습니다.(13장)

목차

01. 실험제목
02. 실험자명
03. 실험날짜
04. 실험목적
05. 실험원리
-적혈구
-빈혈의 정의 종류 원인 증상
- 혈액 응고 방지제 Anticoagulant -
- 헤모글로빈
- Cyanmethemoglobin 법 -
-헤마토크릿
-평균적혈구항수MCV
-평균적혈구용적MCH
-평균적혈구혈색소농도MCHC



06. 실험기구 및 시약
07. 실험방법
08. 실험결과
09. 고찰
10. 참고문헌

본문내용

7. 실험 방법
(1) Red Blood Cell Count
1) 혈액의 희석

2) Counting Chmaber 내에 희석혈액을 채움
이 과정에서는 혈액과 희석액을 충분히 섞어 혈구 분포가 고르게 되도록 한다. 다음 pipet 기둥내의 희석액과 혈구가 섞이지 않는 부분의 액을 4～5방울 버리고 bulb 내의 희석 혈액을 counting chamber에 적당량 채우고 약 5분 가량 안정시켜 적혈구가 가라앉게 한다.

3) 세포수 계산 (counting the cells)
세포수를 현미경으로 관찰하면 어떤 혈구는 납작하게 누워 있고 어떤 혈구는 서있어 마치 동전이 누웠거나 서있는 것과 같은 형태이다. 서있는 혈구를 가라앉히려면 약 5분이 소요되므로 기다리는 것이 좋다. 현미경의 10x로 chamber내의 계산판을 보면 W구획을, 또한 45×로 보면 R구획을 볼 수 있다.

4)계 산
Red cell count는 희석된 혈구 부유액 1㎣내의 적혈구 수를 뜻한다. 그런데 이번 실험에서는 전혈(whole blood)를 희석하여 사용하였고 또한 1㎣내의 적혈구수를 모두 세지는 않았으므로 다시 다음과 같은 계산과정이 필요하다.
즉, 희석 배율과, 계산에 사용된 용량의 수정 배수를 곱해주어야 한다.

(2) Hemoglobin(HB)농도 측정
① 시험관에 drabkin액 5㎖를 정확하게 넣는다.
② 20㎕의 혈액을 시약과 섞고(전도 혼합) 10분간 반응 시킨다.
③ 다시 4～5회 전도 혼합하고 spectronic 20에서 흡광도를 측정한다.
④ Drabkin액을 blank로 하고 540㎚ 파장에서 검체의 흡광도(O.D)를 읽는다.
표준 Hb액의 농도가 16.0g/㎗이므로 이를 이용하여 검체의 Hb농도를 계산한다.

(3) Hematocrit(Ht) 측정
① 지두천자 혈액에 heparin으로 적신 모세 유리관을 갖다 대어 모세관 현상을 이용하여 혈액을 유리관의 ⅔정도 넣는다. 이때 공기가 도중에 들어가는 것을 막기 위해 혈액을 다 넣을 때 까지 혈액으로부터 관을 떼지 않도록 한다.
② 혈액을 넣지 않은 쪽을 creat 씰로 봉하고 원심 분리기에 넣어 11,000rpm 에서 5분간 원심분리한다.
③ 모세 유리관을 꺼내 혈구층의 높이와 전혈액층의 높이를 부속되어 있는 작은 눈금판으로 읽는다.

참고자료

· 승정자외 5인 공저, 1999, 영양판정, 청구문화사, p124~125, p135~137
· 남정혜외 2인 공저, 2000, 영양판정 및 실험, 광문각, p175~252